[发明专利]一种基于DNA自组装和G四聚体的分子检测方法及检测试剂盒有效
| 申请号: | 201510102241.1 | 申请日: | 2015-03-09 |
| 公开(公告)号: | CN104726572B | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
| 发明(设计)人: | 陈俊华;周顺桂;温俊林 | 申请(专利权)人: | 广东省生态环境与土壤研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司44205 | 代理人: | 郑莹 |
| 地址: | 510650 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | 本发明公开一种基于DNA自组装和G四聚体的分子检测方法及检测试剂盒。分子与核酸适体相互作用,启动DNA自组装介导的链置换反应,不断打开茎环结构DNA,并激活封闭的G四聚体序列,从而可以产生大量的具有活性的G四聚体结构。G四聚体与hemin结合后具有HRP催化活性,可催化氧化TMB,产生蓝色底物,使结果肉眼可见,分子的浓度与蓝色深浅直接相关。本发明操作简单,无需工具酶的使用,可在室温下完成整个反应,具有较高的灵敏度,对双酚A的检测限为1 pg/mL,反应具有很好的特异性,检测结果肉眼可见,无需检测仪器,可用于分子,特别是双酚A的现场快速分析。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 基于 dna 组装 四聚体 分子 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种基于DNA自组装和G四聚体的双酚A检测试剂盒,包括TMB显色缓冲液、氯高铁血红素、DNA杂交缓冲液,其特征在于:所述试剂盒还包括如下核酸序列:DNA1:5'‑CGACATCTAACCTAGCTCACTGACCCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA‑3';DNA2:5'‑TAAGCTGGAAGCGTCAGTGA‑3';DNA3:5'‑GTCAGTGAGCTAGGTTAGATGTCGCCATGTGTAGACGACATCTAACCTAGCCCTTGTCATAGAGCAC‑3';DNA4:5'‑AGATGTCGTCTACACATGGCGACATCTAACCTAGCCCATGTGTAGA‑3';DNA5:5'‑CCTTGTCATAGAGCACTCCCTC‑3';DNA6:5'‑CTGGGAGGGAGGGAGGGAGTGCTCTATGACAAGGGCTAGGTT‑3'。
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