[发明专利]基于荧光共振能量转移技术的Caspase-8活性检测荧光探针在审
| 申请号： | 201510088148.X | 申请日： | 2015-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN104592396A | 公开（公告）日： | 2015-05-06 |
| 发明（设计）人： | 华子春;陈典华 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/85;C12Q1/37;G01N15/14 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 徐蓓 |
| 地址： | 210093 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种新的基于荧光共振能量转移技术的Caspase-8活性检测荧光探针，为EBFP2-C8-EGFP，其中，EBFP2和EGFP分别表示增强型蓝色荧光蛋白以及增强型绿色荧光蛋白，C8表示Caspase-8的蛋白酶识别切割位点。本发明还提供了含有该荧光探针的真核表达载体及其构建方法，提供了使用该真核表达载体检测细胞中Caspase-8活性的方法。本发明可在细胞内转染表达该融合荧光探针EBFP2-C8-EGFP，通过测定表达该探针细胞中FRET效率的变化来确定C8酶切位点被切割的效率从而确定细胞中Caspase-8活性的高低，并且通过在流式细胞仪平台上实现了该检测技术，使得这一检测方法能够更加快速、简便、高通量的实现，为Caspase-8抑制剂类药物提供了一个快速、高通量的筛选平台。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 荧光 共振 能量 转移 技术 caspase 活性 检测 探针 | ||
【主权项】：
一种基于荧光共振能量转移技术的Caspase‑8活性检测荧光探针，为EBFP2‑C8‑EGFP，其中，EBFP2和EGFP分别表示增强型蓝色荧光蛋白以及增强型绿色荧光蛋白，C8表示Caspase‑8的蛋白酶识别切割位点。
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