[发明专利]一种鸭的TLR3基因的荧光定量PCR检测方法有效
| 申请号: | 201510067874.3 | 申请日: | 2015-02-09 |
| 公开(公告)号: | CN104651503B | 公开(公告)日: | 2017-01-11 |
| 发明(设计)人: | 刘光清;宋凯杰;陈宗艳;李传峰;孟春春 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/11 |
| 代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司31236 | 代理人: | 郭国中 |
| 地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | 本发明提供了一种鸭的TLR3基因的荧光定量PCR检测方法,所述检测方法包括:以重组质粒pEASY‑T5‑TLR3为模板,筛选引物的最佳浓度、荧光定量PCR反应体系及反应条件;以所述重组质粒为标准品,测定其OD260值;根据其分子量与质量浓度,计算拷贝浓度,稀释,FQ‑PCR扩增,以所述重组质粒拷贝数的对数为X轴,循环次数为Y轴,建立标准曲线;对1.0×103~108拷贝/μL的重组质粒进行重复验证;以重组质粒为模板进行FQ‑PCR检测;通过样品与所述标准品的序列比对及样品的溶解曲线的峰型对检测方法的特异性进行双重验证。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 tlr3 基因 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种用于鸭的TLR3基因的荧光定量PCR检测的重组质粒pEASY‑T5‑zero‑TLR3;所述鸭为北京鸭(Anas platyrhynchos)。
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