[发明专利]1‑芘基‑碳酰肼的合成及其衍生物在糖蛋白特异性预染检测法中的应用

摘要

本发明涉及糖蛋白特异性荧光预染检测法检测技术，具体地说是1‑芘基‑碳酰肼(UGF202)的合成及其衍生物在糖蛋白特异性荧光预染检测中的应用。本发明还提供了应用UGF202进行糖蛋白特异性荧光预染检测的方法，包括步骤向蛋白质样品中加入高碘酸溶液进行氧化；加入抗坏血酸溶液中和过量高碘酸溶液；加入染料反应；加入上样缓冲液；电泳；观察。本预染发明具有灵敏度高、选择性好、操作简单迅速、重现性好、线性关系好、质谱兼容性好、使用安全、成本低廉等优点。此外相对于凝胶电泳后糖蛋白染色方法，预染检测法在电泳结束后即可观察，节省了凝胶电泳后染色步骤，可较好地适用于高通量蛋白质组学的研究。

主权项

一种凝胶上糖蛋白特异性荧光预染检测法，其包括步骤：1)在1‑20μL含0.5‑10μg蛋白样品中加入0.005‑0.05M高碘酸水溶液1‑20μL，置于避光处进行氧化反应2‑20min；2)在反应液中加入0.1‑0.3M抗坏血酸1‑10μL，摇匀反应0.1‑5min；3)在反应液中加入UGF202或其衍生物按体积比0.1‑5％二甲基亚砜溶液1‑5μL，室温下反应5‑20min，其中，UGF202是具有下列化学结构的化合物：衍生物是UGF202的钠盐、钾盐或铵盐；4)在反应液中加入10‑50μL 3X蛋白质上样缓冲液，摇匀；5)电泳，观察。