[发明专利]肺癌干细胞条件3D培养方法在审
| 申请号： | 201510027228.4 | 申请日： | 2015-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN104531620A | 公开（公告）日： | 2015-04-22 |
| 发明（设计）人： | 于津浦;任秀宝;刘芃芃;郝希山 | 申请（专利权）人： | 天津医科大学肿瘤医院 |
| 主分类号： | C12N5/095 | 分类号： | C12N5/095 |
| 代理公司： | 天津市宗欣专利商标代理有限公司 12103 | 代理人： | 董光仁 |
| 地址： | 300060 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肺癌干细胞条件3D培养方法，属于细胞培养方法。本发明是将人肺腺癌细胞系A549用含10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基，置于培养箱中培养，取对数生长期细胞悬液，调整细胞浓度为5×104个细胞/ml，取200μL/孔加到已铺好50μL/孔BME的96孔板里；第3天，用含IGF-1和FGF的RPMI-1640完全培养基给A549细胞换液，继续培养；并经蛋白水解酶消化BME、回收液回收A549细胞，最后进行细胞鉴定。这样设计的本发明，A549细胞在体外形成类似体内肿瘤团块的克隆团，更加接近体内立体生长状态，从而实现干细胞的稳定分离、有效扩增。筛选出对抗癌药物抵抗的肿瘤干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 肺癌 干细胞 条件 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种肺癌干细胞条件3D培养方法，其特征在于：将人肺腺癌细胞系A549用含10%胎牛血清的RPMI‑1640完全培养基，置于培养箱中培养，取对数生长期细胞悬液，调整细胞浓度为5×104个细胞/ml，取200μL/孔加到已铺好50μL/孔BME的96孔板里；于第3天，用含25～75 ng/ml胰岛素样生长因子‑1和10～30ng/ml成纤维细胞生长因子的RPMI‑1640完全培养基给A549细胞换液，继续培养4天；经中性金属蛋白水解酶消化BME、回收液回收A549细胞，最后进行细胞鉴定。
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