[发明专利]肺癌干细胞条件3D培养方法在审
| 申请号： | 201510027228.4 | 申请日： | 2015-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN104531620A | 公开（公告）日： | 2015-04-22 |
| 发明（设计）人： | 于津浦;任秀宝;刘芃芃;郝希山 | 申请（专利权）人： | 天津医科大学肿瘤医院 |
| 主分类号： | C12N5/095 | 分类号： | C12N5/095 |
| 代理公司： | 天津市宗欣专利商标代理有限公司 12103 | 代理人： | 董光仁 |
| 地址： | 300060 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肺癌 干细胞 条件 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种肺癌干细胞条件3D培养方法，其特征在于：
将人肺腺癌细胞系A549用含10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基，置于培养箱中培养，取对数生长期细胞悬液，调整细胞浓度为5×104个细胞/ml，取200μL/孔加到已铺好50μL/孔BME的96孔板里；于第3天，用含25～75 ng/ml胰岛素样生长因子-1和10～30ng/ml成?纤?维?细?胞?生?长?因?子的RPMI-1640完全培养基给A549细胞换液，继续培养4天；经中性金属蛋白水解酶消化BME、回收液回收A549细胞，最后进行细胞鉴定。
2.根据权利要求1所述的肺癌干细胞条件3D培养方法，其特征在于：所述给A549细胞换液的RPMI-1640完全培养基主要含有10%胎牛血清以及50ng/ml的胰岛素样生长因子-1和20ng/ml的成?纤?维?细?胞?生?长?因?子。
3.根据权利要求1所述的肺癌干细胞条件3D培养方法，其特征在于：所述完全培养基在培养箱中培养，以及给A549细胞换液后的完全培养基继续培养，是在置于37℃、5%CO2、相对湿度90%的条件下进行的。
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