[发明专利]用于提高PCR准确度的试剂

摘要

本文提供了用于提高PCR准确度的试剂。

主权项

1.一种聚合酶链反应(PCR)扩增反应混合物，除了在PCR反应缓冲液中的至少一条包含至少一个靶序列的核酸链、至少一对引物、DNA聚合酶和dNTP’s外，其还包含至少一种由一对能够形成50‑800 nM浓度的6‑30个碱基对长、解链温度(Tm)至少32℃并且完全杂交的双链杂交体的互补寡核苷酸组成的添加试剂，所述双链杂交体具有包含相互作用的、共价连接的标记部分的末端，在一条链上为庞大的非平面荧光部分，以及在另一条链上为庞大的非平面荧光部分或非‑庞大的平面部分，其中所述至少一种试剂的两条链均不用作反应中所扩增的模板链上的探针或引物，和其中所述双链杂交体的浓度足以增强聚合酶选择性；其中所述庞大的非平面荧光部分为荧光团并且其中所述非‑庞大的平面部分为非‑荧光猝灭剂，其中所述反应混合物为LATE‑PCR反应混合物。