[发明专利]一种从地龙中提取的CAT酶

摘要

本发明涉及一种从地龙中提取的CAT酶。地龙是一味传统的中药材，在我国传统医药中有着悠久的应用历史，因其作为药物的安全性好，且具有良好的抗氧化功能，是一种提取CAT酶的理想原料。本发明克服现有技术中采用透析方法纯化地龙提取粗酶液的缺陷，将硫酸铵沉淀后的粗酶液溶解于pH7.0～7.4的0.01～0.02mol/L磷酸盐缓冲液中，采用葡聚糖凝胶柱和相同pH值和浓度的磷酸盐缓冲液进行洗脱，实现了目标酶溶液的高效纯化，进一步通过金属螯合亲和柱和磷酸盐缓冲液进行洗脱、浓缩、干燥后，得到高纯度的CAT酶。本发明提供的CAT酶具有良好的生物活性，相应的提取方法具有很好的推广价值。

主权项

一种从地龙中提取的CAT酶，其特征在于，所述CAT酶由包括以下步骤的方法制备而成：1)将地龙浸泡于pH4.8～5.2的0.015～0.025mol/L柠檬酸缓冲液中，分散成匀浆液，离心后取上清，即得粗酶液；2)将硫酸铵加入步骤1)所得粗酶液中，静置，离心后收集沉淀；3)将步骤2)所得沉淀溶解于pH7.0～7.4的0.01～0.02mol/L磷酸盐缓冲液中，将所得溶液加入平衡好的葡聚糖凝胶柱Sephadex G‑25顶端，用本步骤所述磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质且不含硫酸铵的洗脱液，浓缩，得浓缩液；4)在步骤3)所得浓缩液中加入NaCl，得到NaCl浓度为0.4～0.6mol/L的溶液，将所得溶液加入平衡好的金属螯合亲和柱顶端，用pH 5.8～6.2的0.015～0.025mol/L磷酸盐缓冲液进行洗脱，收集含有蛋白质的洗脱液，浓缩，冷冻干燥，即得CAT酶。