[发明专利]一种银耳胞内多糖分离、纯化的方法

摘要

本发明涉及一种银耳多糖的提取及纯化方法，包括：将银耳粉碎，加水浸泡，打浆，加混合酶进行酶解，然后将混合渣液置于循环超声提取机中进行提取；固液分离，浓缩；乙醇静置沉淀，得银耳胞内多糖沉淀物；银耳胞内多糖沉淀物加水,超声波辅助溶解，上D101树脂进行层析；最后将层析液过DEAE纤维素树脂进行分离，合并洗脱液进行浓缩干燥，得纯化后的银耳多糖。本发明可以实现银耳多糖提取的连续化、规模化生产；极大提高了银耳多糖的产率及纯度。

主权项

一种银耳胞内多糖分离、纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将银耳粉碎至40～60目，加20～40倍水浸泡1～2h，打浆；向打浆液中加入混合酶，30～40℃条件下搅拌酶解1.5～2.5 h，酶解结束后，将混合渣液置于循环超声提取机中进行提取；（2）循环超声提取结束后，固液分离，上清液进行浓缩；浓缩倍数为提取液体积的1/6～1/8，优选1/7；提取液浓缩后加85%乙醇进行静置沉淀，得银耳胞内多糖沉淀物；（3）银耳胞内多糖沉淀物加10～15倍去离子水,采用超声波辅助溶解，超声波功率为100W,超声时间为20～30min，溶解液上D101树脂，采用去离子水进行层析；（4）将层析液过DEAE纤维素树脂进行分离，洗脱至流出液检测不到多糖停止洗脱，合并洗脱液；（5）将洗脱液进行浓缩干燥，得纯化后的银耳多糖，步骤(1)中所述的混合酶为纤维素酶与蛋白酶的混合物,二者比例为纤维素酶:蛋白酶=2:1, 纤维素酶的酶活为200‑500u/ml, 蛋白酶的酶活为5‑10 万u/g。