[发明专利]一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物及其制备工艺和应用

摘要

本发明涉及一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物及其制备工艺和应用，属于生物技术领域。该发明所述蓝莓酒泥提取物是通过将蓝莓酒泥脱汁、低温干燥、粉碎后，采用酶法超声波辅助热水浸提，再经三氯乙酸法脱蛋白、透析袋脱盐、超滤去除大分子物质、减压浓缩、真空冷冻干燥制备而成。本发明所述提取物主要成分为蓝莓花色苷、功能性低聚糖，该提取物在PRMI 1640培养基中的浓度达50~250μg/mL时，能够显著抑制肝星状细胞生长，诱导肝星状细胞凋亡。本发明的有益效果在于其既为新型抗肝纤维化保健食品的开发提供了思路，又为蓝莓酒泥的高值化利用提供了操作简单、经济高效的新的技术途径。

主权项

一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物，其特征在于：是由以下方法制备而成的：(1)蓝莓酒泥3000rmp/min离心脱汁20min，取沉淀于45℃～50℃烘箱中烘干至水分含量≤2％，用高速粉碎机粉碎后过80目筛，得蓝莓酒泥干粉；(2)将蓝莓酒泥干粉与水混合，料水比为1:30～1:50(g/mL)，再添加果胶酶HC和纤维素酶，所述果胶酶HC和纤维素酶的添加量占蓝莓酒泥干粉的质量百分比分别为0.05％～0.08％和0.3％～0.5％，混合均匀后用质量比2％的柠檬酸水溶液调节PH至3，超声提取时间为40～60min，再避光提取1h～1.5h，提取温度为50～70℃，抽滤，收集滤液，滤渣再重复提取一次；合并两次提取的滤液，得蓝莓酒泥粗提液；(3)蓝莓酒泥粗提液减压浓缩至总体积的0.1～0.5倍，再经冷冻干燥后得蓝莓酒泥粗提粉；(4)蓝莓酒泥粗提粉与水按10mg/mL的质量体积比混合均匀，再逐滴加入质量比10％的三氯乙酸溶液调节其PH值至3，放置过夜，3000rmp/min离心20min，取上清，得脱蛋白液；(5)脱蛋白液用透析袋脱盐，透析时间为10h，得脱盐液；(6)使用超滤器通过超滤膜除去脱盐液中的大分子物质，得到超滤液；(7)超滤液于50℃减压浓缩至0.1～0.5倍体积，再经冷冻干燥后即得蓝莓酒泥提取物。