[发明专利]一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物及其制备工艺和应用有效
| 申请号: | 201410741953.3 | 申请日: | 2014-12-08 |
| 公开(公告)号: | CN104435062B | 公开(公告)日: | 2018-03-30 |
| 发明(设计)人: | 马艳弘;刘晨;张宏志;李亚辉;黄开红;乔月芳 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号: | A61K36/45 | 分类号: | A61K36/45;A61P1/16;A23L33/00 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司32200 | 代理人: | 张素卿 |
| 地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 诱导 星状 细胞 蓝莓 提取物 及其 制备 工艺 应用 | ||
1.一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物,其特征在于:是由以下方法制备而成的:
(1)蓝莓酒泥3000rmp/min离心脱汁20min,取沉淀于45℃~50℃烘箱中烘干至水分含量≤2%,用高速粉碎机粉碎后过80目筛,得蓝莓酒泥干粉;
(2)将蓝莓酒泥干粉与水混合,料水比为1:30~1:50(g/mL),再添加果胶酶HC和纤维素酶,所述果胶酶HC和纤维素酶的添加量占蓝莓酒泥干粉的质量百分比分别为0.05%~0.08%和0.3%~0.5%,混合均匀后用质量比2%的柠檬酸水溶液调节PH至3,超声提取时间为40~60min,再避光提取1h~1.5h,提取温度为50~70℃,抽滤,收集滤液,滤渣再重复提取一次;合并两次提取的滤液,得蓝莓酒泥粗提液;
(3)蓝莓酒泥粗提液减压浓缩至总体积的0.1~0.5倍,再经冷冻干燥后得蓝莓酒泥粗提粉;
(4)蓝莓酒泥粗提粉与水按10mg/mL的质量体积比混合均匀,再逐滴加入质量比10%的三氯乙酸溶液调节其PH值至3,放置过夜,3000rmp/min离心20min,取上清,得脱蛋白液;
(5)脱蛋白液用透析袋脱盐,透析时间为10h,得脱盐液;
(6)使用超滤器通过超滤膜除去脱盐液中的大分子物质,得到超滤液;
(7)超滤液于50℃减压浓缩至0.1~0.5倍体积,再经冷冻干燥后即得蓝莓酒泥提取物。
2.根据权利要求1所述的一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物,其特征在于,其制备方法步骤(2)中,所述果胶酶HC和纤维素酶的添加量优选0.05%和0.4%,超声提取时间优选50min,提取温度优选60℃。
3.根据权利要求1或2所述的一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物,其特征在于:其制备方法步骤(5)中,所述透析袋的截留分子量为100~500道尔顿,步骤(6)中,所述超滤膜的截留分子量为3000道尔顿,超滤压力为0.18MPa。
4.根据权利要求1或2所述的一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物,其特征在于:所述蓝莓酒泥提取物中花色苷的含量≥26.32%,低聚糖的含量≥45.25%。
5.根据权利要求3所述的一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物,其特征在于:所述蓝莓酒泥提取物中花色苷的含量≥26.32%,低聚糖的含量≥45.25%。
6.权利要求1-5所述的一种诱导肝星状细胞凋亡的蓝莓酒泥提取物的应用,其特征在于:所述蓝莓酒泥提取物在制备抑制肝星状细胞增殖、诱导肝星状细胞凋亡的药物组合物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述蓝莓酒泥提取物在肝星状细胞环境浓度达50~250μg/mL时,抑制肝星状细胞生长、并诱导肝星状细胞凋亡。
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