[发明专利]一种基于HS-β-CD-Ag-GOD共轭物的电化学免疫传感器的制备方法及应用

摘要

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，其公开了一种基于HS-β-CD-Ag-GOD共轭物的电化学免疫传感器的制备方法及应用，用于快速检测猪瘟病毒抗原CSFV。其制作方案是：以裸铂碳电极为工作电极，将MWCNTs-CD-Fc-Ab₁对其进行修饰，然后依次加入牛血清白蛋白、猪瘟病毒抗原CSFV以及Ab₂-HS-β-CD-Ag-GOD共轭物。HS-β-CD-Ag-GOD共轭物可以转化葡萄糖为葡萄糖酸，并传递两个质子和两个电子给氧分子，产生双氧水，HS-β-CD-Ag纳米材料作为一种模拟酶，催化双氧水的还原，实现了电化学信号的双重放大，实现了较高的灵敏度，检测限可低至0.33pg/mL。

主权项

 一种基于HS‑β‑CD‑Ag‑GOD共轭物的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）将直径4 mm 的玻碳电极依次用1.0、0.3和0.05 mm 的三氧化二铝抛光粉抛光处理，乙醇超声清洗，再用超纯水冲洗干净，然后将电极置于5 mmol·L^‑1铁氰化钾溶液中，在‑0.2 ~ 0.6 V电位下扫描，使峰电位差小于80 mV；（2）将pH 7.0，0.1 mol/L的磷酸盐缓冲溶液分散的MWCNTs‑CD‑Fc‑Ab₁修饰于玻碳电极表面，室温干燥，所述MWCNTs‑CD‑Fc‑Ab₁的浓度为1.0 ~ 3.0 mg·mL^‑1；（3）滴涂3 µL、100 µg·mL^‑1的牛血清白蛋白溶液至电极表面，4℃下湿润条件下晾干；（4）滴涂6 µL、0.001 ~ 5.0 ng·mL^‑1的猪瘟病毒抗原CSFV标准溶液至电极表面，4℃下湿润条件下晾干；（5）滴涂6 µL的Ab₂‑CD‑Ag‑GOD溶液至电极表面，4℃下湿润条件下晾干，制得一种基于HS‑β‑CD‑Ag‑GOD共轭物的电化学免疫传感器。