[发明专利]一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法有效
| 申请号: | 201410675075.X | 申请日: | 2014-11-22 |
| 公开(公告)号: | CN104359738B | 公开(公告)日: | 2018-09-14 |
| 发明(设计)人: | 李钧敏;高松;陈露茜;王蓓蕾 | 申请(专利权)人: | 台州学院;李钧敏 |
| 主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30;G01N15/10 |
| 代理公司: | 台州市方圆专利事务所(普通合伙) 33107 | 代理人: | 孙圣贵 |
| 地址: | 318000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | 本发明涉及一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法,属于生物学分析技术领域。为了解决现有技术中只能对鲜样进行分析的问题,提供一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法,该处理方法包括细胞核提取、染色和分析,所述细胞核提取所用细胞核提取液的组分为:Tris:12~18mM;Na2EDTA:1~3mM;盐酸精胺:0.2~0.3mM;KCl:70~90mM,NaCl:10~25mM;β‑巯基乙醇:10~20mM;Triton X‑100:0.2%~0.5%;pH值为6.5~7.0。具有防止细胞核DNA降解和提高稳定性及不易被氧化,且能够适用于各种不同的植物干燥组织,提高了适用范围。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 适用于 细胞 分析 植物 干燥 组织 处理 方法 | ||
【主权项】:
1.一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法,该处理方法包括细胞核提取、染色和分析,其特征在于,所述细胞核提取所用细胞核提取液的组分为:Tris:12mM~18mM;Na2EDTA:1mM~3mM;盐酸精胺:0.2mM~0.3mM;KCl:70mM~90mM,NaCl:10mM~25mM;β‑巯基乙醇:10mM~20mM;Triton X‑100:0.2%(vol/vol)~0.5%(vol/vol);pH值为6.5~7.0;所述处理方法具体包括以下步骤:A、细胞核提取:向干燥的植物组织中加入预冷的细胞核提取液,再进行切碎处理,过滤除去残渣,收集含有细胞核的滤液;B、染色和分析:向上述滤液中加入RNA酶A和碘化丙锭进行染色处理,所述碘化丙锭的浓度为0.15mg/mL~0.25mg/mL,染色处理后,进行流式细胞术分析。
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