[发明专利]一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法

权利要求书

1.一种适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，该处理方法包括细胞核提取、染色和分析，其特征在于，所述细胞核提取所用细胞核提取液的组分为：

Tris：12mM～18mM；Na₂EDTA：1mM～3mM；盐酸精胺：0.2mM～0.3mM；KCl：70mM～90mM,NaCl：10mM～25mM；β-巯基乙醇：10mM～20mM；Triton X-100：0.2％(vol/vol)～0.5％(vol/vol)；pH值为6.5～7.0；

所述处理方法具体包括以下步骤：

A、细胞核提取：向干燥的植物组织中加入预冷的细胞核提取液，再进行切碎处理，过滤除去残渣，收集含有细胞核的滤液；

B、染色和分析：向上述滤液中加入RNA酶A和碘化丙锭进行染色处理，所述碘化丙锭的浓度为0.15mg/mL～0.25mg/mL，染色处理后，进行流式细胞术分析。

2.根据权利要求1所述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，其特征在于，步骤A中所述切碎处理的具体过程为：

将预冷的干燥的植物组织放入预冷的容器中，加入预冷的细胞核提取液，再然后用刀片将植物组织进行第一次切碎处理，过滤，收集含有细胞核的滤液，再采用刀片将剩下的植物组织进行第二次切碎处理，直到将全部的植物组织切碎成糊状。

3.根据权利要求2所述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，其特征在于，步骤A中所述干燥的植物组织的重量与细胞核提取液体积的用量比为：50：1～45：1，所述干燥的植物组织的重量单位为毫克，所述细胞核提取液的体积单位为毫升。

4.根据权利要求2或3所述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，其特征在于，所述刀片的厚度为0.1mm～0.3mm。

5.根据权利要求1-3任意一项所述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，其特征在于，步骤B中所述碘化丙锭的浓度为0.18mg/mL～0.22mg/mL。

6.根据权利要求1-3任意一项所述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，其特征在于，步骤A中所述干燥的植物组织选自经过硅胶干燥、自然风干或压干标本的植物干燥组织。

7.根据权利要求1-3任意一项所述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，其特征在于，步骤B中所述流式细胞术分析采用的流式分析仪为Attune声波聚焦流式细胞分析仪。

8.根据权利要求7所述适用于流式细胞分析植物干燥组织的处理方法，其特征在于，步骤B中所述Attune声波聚焦流式细胞分析仪的参数设置为：