[发明专利]细胞胞内氨基酸代谢轮廓分析方法在审
申请号: | 201410581881.0 | 申请日: | 2014-10-27 |
公开(公告)号: | CN105527350A | 公开(公告)日: | 2016-04-27 |
发明(设计)人: | 许国旺;周丽娜;尹沛源;高鹏;路鑫 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 马驰 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种针对少量细胞(103-104个)的胞内代谢轮廓高通量分析方法,包括简便、高效的细胞淬灭及代谢物提取,代谢物衍生化,以及质谱检测等步骤。本发明公开的胞内代谢轮廓高通量分析方法具有简便快速,灵敏度高且重复性好的特点,适合于96孔板内培养的细胞以及收获量少的细胞的代谢组高通量分析,如药物的大规模筛选、评价以及干细胞研究等。 | ||
搜索关键词: | 细胞 氨基酸 代谢 轮廓 分析 方法 | ||
【主权项】:
细胞胞内氨基酸代谢轮廓分析方法,所述方法包括:(a)取洗去培养基的细胞,利用冷甲醇水溶液对细胞进行代谢淬灭和低温静置提取,离心或过滤,得细胞胞内代谢物提取液;(b)采用丹磺酰氯作为衍生化试剂,对提取液中含氨基及酚羟基代谢物进行衍生,终止衍生后,离心或过滤,收集衍生后的溶液;(c)采用液相色谱‑质谱联用的方法,在正离子模式下对衍生后溶液中的细胞胞内代谢物进行检测。
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