[发明专利]一种高灵敏度反向斑点杂交方法及应用在审
| 申请号： | 201410415011.6 | 申请日： | 2014-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN105648039A | 公开（公告）日： | 2016-06-08 |
| 发明（设计）人： | 杨华卫;曾冀 | 申请（专利权）人： | 北京百诺奇生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高灵敏度反向斑点杂交方法，该方法通过在金属膜表面上实现核酸杂交过程与碱性磷酸酶联过程合二为一进行，从而可以在金属膜表面直接形成碱性磷酸酶标记核酸杂交体的偶联物。本发明通过一步反应后的显色反应，根据着色的深浅以及杂交信号与金属膜的强烈色差，可以用肉眼快速判断核酸杂交的结果，极大提高了反向斑点杂交的检测灵敏度与分辨能力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 灵敏度 反向 斑点 杂交 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种高灵敏度反向斑点杂交方法，其包括如下步骤：A)将至少一种核酸探针固定在固相支持物负载的金属膜表面；B)利用预处理液对所述金属膜表面进行预处理；C)将所述核酸探针在包含碱性磷酸酶标记链霉亲和素的杂交液中与生物素标记的靶核酸进行一步反应；D)步骤C)中反应完成后，利用后处理液对所述金属膜表面进行后处理；E)将包含底物的显色溶液与金属膜表面接触进行显色反应。
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