[发明专利]一种冬虫夏草发酵液回收孢子半连续培养方法

摘要

本发明冬虫夏草发酵培养技术领域，尤其是一种冬虫夏草发酵液回收孢子半连续培养方法，包括准备半连续发酵罐、培养基准备、发酵检测、浓缩菌丝体，分离发酵液和孢子、继续发酵培养步骤，通过过滤时选择膜过滤器，甚至选择选择性膜过滤，减少进入滤液的菌丝体，既能提高菌丝体的收率，降低滤液的COD，降低污水处理量，又不破坏细胞本身，保证胞内有效成分的全部回收；选择性膜过滤系统对于菌丝和孢子的分离效果好，分离出来的冬虫夏草孢子数量较大，并且环境变换温和，所以缩短了种子液的适应时间，直接进入倍增发酵过程，从而发酵周期也随之缩短16个小时左右；提高了生产效率，降低生产电耗，获得较好的效益。

主权项

一种冬虫夏草发酵液回收孢子半连续培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)准备半连续发酵罐：使用净化蒸汽对空罐、管道、过滤器及阀门在压力为0.1～0.15MPa，温度121～124℃，持续灭菌30～50min；并将空罐、管道、过滤器以及阀门连接起来；(2)培养基准备：将培养基装入步骤1)的空罐之中，装入量为空罐体积容量的50‑55％，并在压力为0.12～0.15MPa，温度121～126℃条件下灭菌35‑45min；随后，更换无菌风维持压力，启动冷水循环系统进行降温到20～30℃后，接种发酵培养；(3)发酵检测：当发酵进行到100‑120h后，对发酵罐取样，进行发酵液检测，当分生孢子≥90％的脱落母体孢子梗，孢子梗数量增加不明显时，菌丝培养结束；(4)浓缩菌丝体，分离发酵液和孢子：将步骤3)中的含有菌丝体及孢子的培养液，经过过滤器进行过滤处理，获得冬虫夏草的孢子和部分发酵液；(5)继续发酵培养：将步骤4)获得的冬虫夏草孢子和纯净的发酵液以及原料液再返回半连续发酵罐中，作为发酵罐的种子，继续进行冬虫夏草的半连续发酵培养。