[发明专利]一种青霉素酰化酶的制备方法在审
| 申请号： | 201410365989.6 | 申请日： | 2014-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN104087565A | 公开（公告）日： | 2014-10-08 |
| 发明（设计）人： | 李红飞;刘健;陈英新;徐永龙;梅玉龙;郝金恒;李银;袁国强 | 申请（专利权）人： | 石药集团中诺药业（石家庄）有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 石家庄元汇专利代理事务所(特殊普通合伙) 13115 | 代理人： | 刘闻铎 |
| 地址： | 050000 *** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种青霉素酰化酶的制备方法，该方法为微生物发酵法，采用大肠杆菌逐级制备一级种子和二级种子，然后使用二级种子在发酵培养基中进行发酵制备得到青霉素酰化酶，制备得到的青霉素酰化酶的活性在40000U/L以上，显著提高了生产效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 青霉素 酰化酶 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种青霉素酰化酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a.取大肠杆菌，在35‑40℃条件下制备一级种子和二级种子，所用种子培养基含有蛋白胨，酵母浸膏，NaCl；b.将步骤a制备的二级种子接种至发酵培养基中，在35‑40℃培养15‑30h，得到发酵液，所述发酵培养基含有甘油，酵母粉，蛋白胨，NaCl，微量元素水溶液；c.将步骤b制备的发酵液进行离心，弃去上清液，收集下层的菌体浓缩液，即得到青霉素酰化酶的粗品溶液；d.将步骤c所得青霉素酰化酶的粗品溶液进行均质，絮凝，超滤浓缩，沉淀除去杂蛋白，最后进行透析浓缩，即得到青霉素酰化酶纯品。
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