[发明专利]一种快速高通量检测细菌文库质粒大小的方法在审
| 申请号： | 201410351775.3 | 申请日： | 2014-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN105274191A | 公开（公告）日： | 2016-01-27 |
| 发明（设计）人： | 刘晓艳;傅克承;付克平;张薇;程猛 | 申请（专利权）人： | 武汉百杜生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种快速高通量检测细菌文库质粒大小的方法，该方法为经过4步不同的处理：菌体悬浮，菌体裂解、除蛋白、跑DNA凝胶电泳，不需要抽提质粒，也不必做PCR，2个小时内即可出结果，获得细菌文库中重组质粒的大小。该方法快速可靠，操作简单，节约成本，重复性好，实现高通量筛选，尤其适合于经常从事大规模的克隆工作使用，具有较好的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 通量 检测 细菌 文库 质粒 大小 方法 | ||
【主权项】：
一种快速高通量检测细菌文库质粒大小的方法，具体步骤下：1）菌体悬浮，利用溶液I在离心管中进行菌体悬浮；溶液I的配方对于革兰氏阴性菌是25mM Tris‑HCl，25mM EDTA，0.02%m/v溴酚兰；对于革兰氏阳性菌是0.2%m/v溶菌酶，25mM Tris‑HCl，25mM EDTA，0.02%m/v溴酚兰；2）菌体裂解，在步骤1）的离心管中加入溶液II，溶液II的配方是0.3M NaOH，2%m/vSDS混匀后置于70℃水浴锅中水浴15分钟；3）除蛋白，在步骤2）的离心管中加入溶液III，混匀后，12000 rpm离心10分钟，溶液III的配方是苯酚：氯仿：异戊醇按照体积比25：24：1进行配制；4）进行DNA凝胶电泳，取步骤3）中的离心上清液直接点样进行0.8%的DNA凝胶电泳即可判断重组质粒插入片段的大小。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉百杜生物科技有限公司，未经武汉百杜生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410351775.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
