[发明专利]一种利用氢气提高白桦细胞中总三萜和白桦脂醇含量的方法有效
| 申请号： | 201410270442.8 | 申请日： | 2014-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN104087644B | 公开（公告）日： | 2018-04-27 |
| 发明（设计）人： | 曾凡锁;姜涛;詹亚光;辛颖;孙丰坤;齐凤慧;范桂枝;由香玲;尹静 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学;曾凡锁;姜涛 |
| 主分类号： | C12P33/00 | 分类号： | C12P33/00 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人： | 吴开磊 |
| 地址： | 150040 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种利用氢气提高白桦细胞中总三萜和白桦脂醇含量的方法。以白桦悬浮细胞为材料，按50g/L接种量接种于100mL B5液体培养基中，附加0.1～0.3mg/L6‑BA和0.5～4.0mg/L TDZ，蔗糖20g/L，酸水解酪蛋白1g/L，pH5.5～6.0。在细胞悬浮培养第8天通入氢气使其终浓度为0.5‑1.5mmol/L，培养12h后收获，白桦脂醇含量最高为1.11mg/gDW，是对照组185.1％。培养24h后收获，细胞内总三萜含量达到24.37mg/gDW，为对照组的181.32％。氢气具有无毒无害的优势，方便代谢产物的分离和纯化。该发明为解决天然植物药物来源紧缺和工业化大规模生产白桦三萜和白桦脂醇药物提供了一种新途径。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 氢气 提高 白桦 细胞 中总三萜 含量 方法 | ||
【主权项】：
一种利用氢气提高白桦细胞中总三萜和白桦脂醇含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)以白桦悬浮细胞为实验材料，按50g/L接种量接种于100mL B5液体培养基中，培养条件为：120rpm，25℃，光照强度2000lx，光周期16h，湿度40％～50％，培养周期为10d，培养基成分为B5基本培养基，添加0.1‑0.3mg/L 6‑BA和0.5～4.0mg/L TDZ，20g/L蔗糖，1g/L酸水解酪蛋白，pH5.5～6.0，121℃高温高压灭菌20min；步骤2)在细胞悬浮培养第8天加入富氢水使其终浓度为0.5‑1.5mmol/L，培养12至24h后收获悬浮细胞。
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