[发明专利]一种清真肉类食品的分子鉴定方法有效
| 申请号: | 201410259544.X | 申请日: | 2014-06-12 |
| 公开(公告)号: | CN104032004A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
| 发明(设计)人: | 曹晓虹;陈海魁;于淑坤;龚波林 | 申请(专利权)人: | 北方民族大学 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
| 地址: | 750021 宁夏回族*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种清真肉类食品的分子鉴定方法,该清真肉类食品的分子鉴定方法包括:取将待检测样品25mg,使用通用型柱式基因组提取试剂盒提取基因组DNA,操作步骤中Proteinase K消化时,采取过夜处理,消化时间10个小时以上;使用设计的引物16SA-SB-ZNYF和16SA-SB-ZNYR,对提取的DNA进行PCR扩增,PCR反应程序94度4min,94度30s,53度30s,72度1.5min,72度10分钟;然后将扩增产物,交生物测序公司使用3730测序仪测序;将测序产物与给出的序列联合,使用Clustalx软件进行比对,并构建NJ树,鉴定是否有猪肉狗肉和驴肉的非清真成分存在。本发明针对猪肉新设计了专用扩增引物,可以高效率扩增猪肉DNA,即使食品中含有微量猪肉、狗肉或驴肉DNA也可以被识别,可以准确区分出猪肉、狗肉或驴肉成分。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 清真 肉类 食品 分子 鉴定 方法 | ||
【主权项】:
一种清真肉类食品的分子鉴定方法,其特征在于,该清真肉类食品的分子鉴定方法包括以下步骤:第一步,取将待检测样品25mg,使用通用型柱式基因组提取试剂盒提取基因组DNA,操作步骤中Proteinase K消化时,采取过夜处理,消化时间10个小时以上;第二步,使用设计的引物16SA‑SB‑ZNYF和16SA‑SB‑ZNYR,对提取的DNA进行PCR扩增,PCR反应程序94度4min,94度30s,53度30s,72度1.5min,72度10分钟;第三步,然后将扩增产物,交生物测序公司使用3730测序仪测序;第四步,将测序产物与给出的序列联合,使用Clustalx软件进行比对,并构建NJ树,鉴定是否有猪肉狗肉和驴肉的非清真成分存在。
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