[发明专利]一种小核糖核酸的电化学检测方法有效
申请号: | 201410259207.0 | 申请日: | 2014-06-12 |
公开(公告)号: | CN103993097A | 公开(公告)日: | 2014-08-20 |
发明(设计)人: | 韩坤;缪鹏;王弼陡;唐玉国 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 史霞 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于微量微小RNA的电化学检测方法,包括以下步骤:固定在电极表面报告DNA与阻塞DNA形成双链a;阻塞DNA与靶标微小RNA分子结合,形成双链b,使阻塞DNA从电极表面脱离;引物DNA与双链b中阻塞DNA末端序列结合,自我复制形成DNA双链c,并将靶标微小RNA置换下来;被置换下来的靶标微小RNA又重新回到工作电极表面,与其他的双链a反应,N次循环反应后,电极表面的茎环结构的报告DNA也越来越多,进而电化学信号也越来越强,从而实现对单分子微小RNA的电化学检测。同样的原理还可推广到DNA,siRNA的检测中,应用前景广泛。 | ||
搜索关键词: | 一种 核糖核酸 电化学 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种用于微量靶标microRNA的电化学检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一 报告DNA打开茎环结构,与阻塞DNA形成双链a,并被固定到工作电极表面;或者报告DNA固定到电极表面后与阻塞DNA形成双链a步骤二 靶标microRNA与双链a中的阻塞DNA结合,形成双链b,使阻塞DNA从工作电极表面脱离,报告DNA自发形成茎环结构;步骤三 引物DNA与双链b中阻塞DNA末端序列结合,在DNA聚合酶的作用下,延伸,形成DNA双链c,同时将靶标microRNA置换下来;步骤四 被置换下来的靶标microRNA又重新回到工作电极表面,与其他的工作电极表面的双链a发生反应;步骤五 经过上述N次循环反应后,工作电极表面的茎环结构的报告DNA也越来越多,工作电极表面电信号会越来越强,从而实现对痕量微小RNA的电化学单分子检测。
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