[发明专利]一种小核糖核酸的电化学检测方法

权利要求书

1.一种用于微量靶标microRNA的电化学检测方法，其特征在于，包括以

下步骤：

步骤一 报告DNA打开茎环结构，与阻塞DNA形成双链a，并被固定到工作电极表面；或者报告DNA固定到电极表面后与阻塞DNA形成双链a

步骤二 靶标microRNA与双链a中的阻塞DNA结合，形成双链b，使阻塞DNA从工作电极表面脱离，报告DNA自发形成茎环结构；

步骤三 引物DNA与双链b中阻塞DNA末端序列结合，在DNA聚合酶的作用下，延伸，形成DNA双链c，同时将靶标microRNA置换下来；

步骤四 被置换下来的靶标microRNA又重新回到工作电极表面，与其他的工作电极表面的双链a发生反应；

步骤五 经过上述N次循环反应后，工作电极表面的茎环结构的报告DNA也越来越多，工作电极表面电信号会越来越强，从而实现对痕量微小RNA的电化学单分子检测。

2.如权利要求1所述的用于靶标microRNA的电化学单分子检测方法，其特征在于，所述靶标microRNA、报告DNA、阻塞DNA和引物DNA均为单链分子。

3.如权利要求1所述的用于靶标microRNA的电化学单分子检测方法，其特征在于，所述报告DNA连接基团和电信号分子，分别位于报告DNA分子两端。

4.如权利要求1所述的用于靶标microRNA的电化学单分子检测方法，其特征在于，所述阻塞DNA通过与报告DNA互补配对被固定于电极表面，但不是直接连接于工作电极表面。

5.如权利要求1所述的用于靶标microRNA的电化学单分子检测方法，其特征在于，所述阻塞DNA上有一段可以与靶标microRNA配对的碱基序列。

6.如权利要求1所述的用于靶标microRNA的电化学单分子检测方法，其特征在于，靶标microRNA是可以重复利用的。

7.如权利要求1或3所述的用于靶标microRNA的电化学单分子检测方法，其特征在于，所述报告DNA与阻塞DNA形成双链a时，报告DNA3′端电信号分子远离金电极表面，电信号减弱。

8.如权利要求3所述的用于靶标microRNA的电化学单分子检测方法，其特征在于，所述报告DNA在单链分子状态下形成茎环结构时报告DNA3′端带有电信号分子，靠近工作电极表面，增强电信号。