[发明专利]检测A型和B型流感病毒、人偏肺病毒，NL63型、HKU1型和OC43型人冠状病毒的试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种检测A型和B型流感病毒、人偏肺病毒，NL63型、HKU1型和OC43型人冠状病毒的试剂盒，包括病原体特异性引物和病原体基因探针。本发明的上述检测A型和B型流感病毒、人偏肺病毒，以及NL63型、HKU1型和OC43型人冠状病毒的试剂盒，基于多重荧光实时PCR和Tem-PCR技术之上，采用特异性设计的病原体引物和病原体基因探针，进行RT-PCR，可以大大提高了扩增效率，从而用普通的TaqDNA聚合酶仍能使检测结果具有很高的检测灵敏度，解决了传统多重PCR扩增效率低和检测灵敏度低的问题。

主权项

一种检测A型和B型流感病毒、人偏肺病毒，NL63型、HKU1型和OC43型人冠状病毒的试剂盒，其特征在于，包括病原体特异性引物和病原体基因探针；所述病原体特异性引物包括：A型流感病毒上游引物：5’‑GACCRATCCTGTCACCTCTGAC‑3’；A型流感病毒下游引物：5’‑GGGCATTYTGGACAAAKCGTCTACG‑3’；B型流感病毒上游引物：5’‑TCCTCAACTCACTCTTCGAGCG3’；B型流感病毒下游引物：5’‑CGGTGCTCTTGACCAAATTGG‑3’；人偏肺病毒上游引物：5’‑CATATAAGCATGCTATATTAAAAGAGTCTC‑3’；人偏肺病毒下游引物：5’‑CCTATTTCTGCAGCATATTTGTAATCAG‑3’；NL63型人冠状病毒上游引物：5’‑GGCCATAAGATTGCTACTCGTG‑3’；NL63型人冠状病毒下游引物：5’‑CTCCTGAGAGGCAACACCA‑3’；HKU1型人冠状病毒上游引物：5’‑ATTCACTGTGTCTACTCAACCAC‑3’；HKU1型人冠状病毒下游引物：5’‑CCGAAAGCAATGGGAACTCC‑3’；OC43型人冠状病毒上游引物：5’‑GGTTACTATATTGAAGGCTCAGGAAGG‑3’；OC43型人冠状病毒下游引物：5’‑TGGCTCTACTACGCGATCCT‑3’；所述病原体基因探针包括：A型流感病毒基因探针5’‑TGCAGTCCTCGCTCACTGGGCACG‑3’；B型流感病毒基因探针5’‑CACCGCAGTTTCAGCTGCTCGAATTGG‑3’；人偏肺病毒基因探针5’‑TGYAATGATGAGGGTGTCACTGCGGTTG‑3’；NL63型人冠状病毒基因探针5’‑GAATGCCCAACCAGTCTGGC‑3’；HKU1型人冠状病毒基因探针5’‑ATTATTCCTGGTTCTCCGGGATCACTC‑3’；OC43型人冠状病毒基因探针5’‑GCT CTG CTG GAT GTG CGC GAA GTA GA‑3’。