[发明专利]一种利用BiFC指示细胞中Wnt信号活性状态的载体组合物及应用

摘要

本发明公开了一种利用BiFC指示细胞中Wnt信号活性状态的系统及应用。本发明提供了一种融合蛋白组，由融合蛋白A和融合蛋白B组成，所述融合蛋白A包括核心效应因子β-catenin片段和位于其C段的荧光蛋白片段A；所述融合蛋白B包括转录因子TCF和位于其N段的荧光蛋白片段B。本发明的实验证明，本发明利用依据双分子荧光互补技术(BiFC)的策略将Wnt信号通路中核心效应因子β-catenin与转录因子TCF形成的复合体可视化，从而直接显示Wnt在细胞中的活性状态，本发明将BiFC系统瞬时转染细胞或构建成稳定表达细胞系，可观察到细胞核中形成的特异信号，该信号可以特异显示并反映活细胞中Wnt信号通路活性状态及其变化。

主权项

一种用于检测细胞内Wnt信号活性状态的融合蛋白组，由融合蛋白A和融合蛋白B组成：所述融合蛋白A包括β‑catenin的C端缺失片段和位于其C段的荧光蛋白片段A；所述融合蛋白B包括转录因子TCF和位于其N段的荧光蛋白片段B；所述β‑catenin的C端缺失片段为β‑catenin蛋白氨基酸序列N末端起第2‑667个氨基酸残基。