[发明专利]鸡新城疫糖蛋白病毒抗原的制备方法及其产品有效
申请号: | 201410196203.2 | 申请日: | 2014-05-09 |
公开(公告)号: | CN104059927B | 公开(公告)日: | 2018-01-09 |
发明(设计)人: | 张志芳;李轶女;王智权;易咏竹;李浩洋;李田田;胡小元 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/45 | 分类号: | C12N15/45;C12N15/56;C12N15/866;C12N9/24;C12N7/01;C07K14/125;A61K39/17;A61P31/14 |
代理公司: | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙)11598 | 代理人: | 余光军 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种鸡新城疫糖蛋白病毒抗原的制备方法及其产品。本发明根据病毒流行趋势预测将鸡新城疫病毒F基因以及HN基因进行优化。本发明进一步将鸡新城疫病毒糖蛋白抗原基因、优化后的抗原基因或串联的优化抗原基因组合在家蚕生物反应器中进行表达,所表达的抗原或制备的重组病毒能为动物提供有效的免疫保护。本发明还提供了一种鸡新城疫病毒抗原基因呈递载体的制备方法,包括将鸡新城疫病毒抗原优化基因或串联的优化抗原基因组合克隆进哺乳动物启动子控制的杆状病毒运载载体中,重组得到含哺乳动物启动子控制的基因呈递载体;通过注射或口服等方式将其进入到动物体内后,能在动物体内高效呈递抗原基因,有效抵御新城疫病毒的攻击。 | ||
搜索关键词: | 新城 糖蛋白 病毒 抗原 制备 方法 及其 产品 | ||
【主权项】:
一种鸡新城疫病毒抗原基因家蚕杆状病毒呈递载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将SEQ ID NO.5所示的经优化的鸡新城疫病毒糖蛋白基因F‑O与哺乳动物细胞启动子一起克隆到杆状病毒运载载体中,构建得到转移表达载体;或者将SEQ ID NO.5所示的经优化的鸡新城疫病毒糖蛋白基因F‑O与优化后的鸡新城疫病毒血凝素神经氨酸酶基因HN‑O串联在一起的序列与哺乳动物细胞启动子一起克隆到杆状病毒运载载体中,构建得到转移表达载体,其中,所述鸡新城疫病毒血凝素神经氨酸酶基因HN的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示,SEQ ID NO.5所示的经优化的鸡新城疫病毒的糖蛋白基因F‑O与优化后的鸡新城疫病毒血凝素神经氨酸酶基因HN‑O串联在一起的序列为SEQ ID NO.9所示;所述的哺乳动物细胞启动子为CAG启动子;(2)将构建得到的转移表达载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞获得重组杆状病毒;(3)将重组杆状病毒感染昆虫宿主,扩增重组杆状病毒,即得。
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