[发明专利]鸡新城疫糖蛋白病毒抗原的制备方法及其产品有效
申请号: | 201410196203.2 | 申请日: | 2014-05-09 |
公开(公告)号: | CN104059927B | 公开(公告)日: | 2018-01-09 |
发明(设计)人: | 张志芳;李轶女;王智权;易咏竹;李浩洋;李田田;胡小元 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/45 | 分类号: | C12N15/45;C12N15/56;C12N15/866;C12N9/24;C12N7/01;C07K14/125;A61K39/17;A61P31/14 |
代理公司: | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙)11598 | 代理人: | 余光军 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新城 糖蛋白 病毒 抗原 制备 方法 及其 产品 | ||
1.一种鸡新城疫病毒抗原基因家蚕杆状病毒呈递载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将SEQ ID NO.5所示的经优化的鸡新城疫病毒糖蛋白基因F-O与哺乳动物细胞启动子一起克隆到杆状病毒运载载体中,构建得到转移表达载体;或者将SEQ ID NO.5所示的经优化的鸡新城疫病毒糖蛋白基因F-O与优化后的鸡新城疫病毒血凝素神经氨酸酶基因HN-O串联在一起的序列与哺乳动物细胞启动子一起克隆到杆状病毒运载载体中,构建得到转移表达载体,其中,所述鸡新城疫病毒血凝素神经氨酸酶基因HN的核苷酸序列为SEQ ID NO.3所示,SEQ ID NO.5所示的经优化的鸡新城疫病毒的糖蛋白基因F-O与优化后的鸡新城疫病毒血凝素神经氨酸酶基因HN-O串联在一起的序列为SEQ ID NO.9所示;所述的哺乳动物细胞启动子为CAG启动子;
(2)将构建得到的转移表达载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞获得重组杆状病毒;
(3)将重组杆状病毒感染昆虫宿主,扩增重组杆状病毒,即得。
2.按照权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述的杆状病毒运载载体为pVL1393;
所述的杆状病毒为BmNPV;
所述的昆虫宿主为家蚕;
所述的感染为将重组家蚕杆状病毒感染家蚕细胞或穿刺接种1-5龄的家蚕幼虫或蛹体,在感染3-6天后收集含各种抗原的家蚕幼虫或蛹的体液或组织匀浆或在昆虫体内繁殖的重组病毒。
3.按照权利要求2所述的制备方法,其特征在于:所述的蛹体为1-2天的早期嫩蛹。
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