[发明专利]一种毛蚶蛋白质的鉴别方法

摘要

本发明涉及一种毛蚶蛋白质的鉴别方法，其特征在于使用凝胶色谱柱高效液相色谱法，提供一种毛蚶蛋白质多肽的专属性鉴别方法，使毛蚶制剂在生产和使用中有效的保证产品质量，进而保证药品疗效。

主权项

一种毛蚶蛋白质多肽的鉴别方法，其特征在于使用凝胶色谱柱高效液相色谱法，具体步骤如下：色谱条件及系统适应性：用亲水球形高聚物为填充剂的凝胶色谱柱；以0.01‑0.10mol/L的磷酸盐缓冲液为流动相；检测波长为280 nm；柱温：20‑40℃；流速：0.1ml‑1ml /min；理论板数按蛋白质分子量100000计算应不低于3000；制备毛蚶多肽：取毛蚶制剂研细，称取含毛蚶提取物约5‑20g的样品，加10‑15倍水超声提取20‑40 min，离心5‑15 min，取上层液，滤过，滤液按体积分数50‑70%（w/v）加入硫酸铵，0～4℃放置过夜，离心，取沉淀，加水5‑10ml溶解，以0.5‑2%的碳酸氢铵溶液为透析液，用截留分子量为3500的透析膜，0～4℃条件下充分透析（用0.5‑2％的BaCl2溶液检查硫酸根离子是否透析完全），将透析膜内溶液转移至20‑100ml量瓶内，用水定容，0～4℃保存，即得毛蚶多肽供试品；              测定：取毛蚶多肽供试品溶液10‑100μl，注入液相色谱仪，测定；毛蚶多肽图谱中在保留时间15.6min左右有一尖锐的特征峰“峰S”，峰S保留时间差异应在±5%之内。