[发明专利]一种毛蚶蛋白质的鉴别方法

权利要求书

1.一种毛蚶蛋白质多肽的鉴别方法，其特征在于使用凝胶色谱柱高效液相色谱法，具体步骤如下：

色谱条件及系统适应性：用亲水球形高聚物为填充剂的凝胶色谱柱；以0.01-0.10mol/L的磷酸盐缓冲液为流动相；检测波长为280 nm；柱温：20-40℃；流速：0.1ml-1ml /min；理论板数按蛋白质分子量100000计算应不低于3000；

制备毛蚶多肽：取毛蚶制剂研细，称取含毛蚶提取物约5-20g的样品，加10-15倍水超声提取20-40 min，离心5-15 min，取上层液，滤过，滤液按体积分数50-70%（w/v）加入硫酸铵，0～4℃放置过夜，离心，取沉淀，加水5-10ml溶解，以0.5-2%的碳酸氢铵溶液为透析液，用截留分子量为3500的透析膜，0～4℃条件下充分透析（用0.5-2％的BaCl2溶液检查硫酸根离子是否透析完全），将透析膜内溶液转移至20-100ml量瓶内，用水定容，0～4℃保存，即得毛蚶多肽供试品；

测定：取毛蚶多肽供试品溶液10-100μl，注入液相色谱仪，测定；

毛蚶多肽图谱中在保留时间15.6min左右有一尖锐的特征峰“峰S”，峰S保留时间差异应在±5%之内。

2.根据权利要求1的一种毛蚶多肽的鉴别方法，其特征在于色谱条件及系统适应性：用亲水球形高聚物为填充剂的凝胶色谱柱；以0.05 mol/L的磷酸盐缓冲液为流动相；检测波长为280 nm；柱温：25℃；流速：0.4ml/min；理论板数按蛋白质分子量100000计算应不低于5000。

3.根据权利要求1的一种毛蚶多肽的鉴别方法，其特征在于制备毛蚶多肽为：取毛蚶制剂研细，称取含毛蚶提取物约10-12g，加10-12倍水超声提取30-35 min，离心8-12 min，取上层液，滤过，滤液按体积分数60-65%（w/v）加入硫酸铵，0～4℃放置过夜，离心，取沉淀，加水10ml溶解，以1%的碳酸氢铵溶液为透析液，用截留分子量为3500的透析膜，0～4℃条件下充分透析（用0.8-1％的BaCl2溶液检查硫酸根离子是否透析完全），将透析膜内溶液转移至25-50ml量瓶内，用水定容，0～4℃保存，即得毛蚶多肽供试品。

4.根据权利要求1或权利要求3的一种毛蚶多肽的鉴别方法其特征在于制备毛蚶多肽为：取毛蚶制剂研细，称取含毛蚶提取物10 g，加12倍水超声提取30 min，离心10 min，取上层液，滤过，滤液按体积分数60%（w/v）加入硫酸铵，0～4℃放置过夜，离心，取沉淀，加水10ml溶解，以1%的碳酸氢铵溶液为透析液，用截留分子量为3500的透析膜，0～4℃条件下充分透析（用1％的BaCl2溶液检查硫酸根离子是否透析完全），将透析膜内溶液转移至50ml量瓶内，用水定容，0～4℃保存，即得毛蚶多肽供试品。

5.根据权利要求1的一种毛蚶多肽的鉴别方法，其特征在于取毛蚶多肽供试品溶液10-50μl，注入液相色谱仪，测定。

6.根据权利要求1或权利要求6的一种毛蚶多肽的鉴别方法，其特征在于取毛蚶多肽供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定。

7.根据权利要求1或权利要求2或权利要求3或权利要求4或权利要求5或权利要求6或权利要求7的一种毛蚶多糖的鉴别方法，其特征在于用于毛蚶提取物及其各种制剂的鉴别。

8.根据权利要求1或权利要求2或权利要求3或权利要求4或权利要求5或权利要求6或权利要求7的一种毛蚶多肽的鉴别方法，其特征在于用于魁蚶、泥蚶、花蛤、扇贝提取物及其各种制剂的鉴别。