[发明专利]具有解酒功能厌氧菌的筛选方法

摘要

本发明公开了一种具有解酒功能厌氧菌的筛选方法。方法包括配制筛选用培养基；取发酵乳、泡菜等发酵食品；液体富集培养；固体培养基分离；得到初筛菌株的纯培养物；定量分析初筛菌株的解酒能力，选取性能突出的菌株即可。本发明筛选的菌株能在体内厌氧环境中迅速降解乙醇，并安全可靠。本发明方法具有简单有效、针对性强、培养周期短等优点，并且能筛选出安全高效的解酒功能菌株。

主权项

一种具有解酒功能厌氧菌的筛选方法，其特征在于它包括如下步骤：1)分别配制液体富集培养基和固体筛选培养基；2)取发酵乳、泡菜发酵食品样品5~8 g；3)将步骤2)的食品样品于步骤1)的液体富集培养基中厌氧培养5~10 h，使乙醇耐受菌充分富集，得到富集培养液；4)将固体培养基加热融化，然后冷却至45℃，迅速将1 mL富集培养液与之混合，摇匀后放入厌氧培养箱中、37℃条件下培养，直至长出菌落，得到具有解酒功能厌氧菌株；5)对具有解酒功能厌氧菌株分离纯化，并得到具有解酒功能厌氧菌株的纯培养物；6)将具有解酒功能厌氧菌株的纯培养物接于MRS液体培养基于厌氧培养箱中、36~38℃条件下培养36~48 h，得到菌液；7)各取200 μL菌液，以空白培养液作为参照，分光光度计下600 nm处测定样品菌液相对浓度OD₆₀₀，根据读数用无菌水稀释菌液至相同菌液浓度10⁶~10⁸ cfu/mL；8)将稀释的菌液5 mL分别与等体积5 %~80 %（v/v）乙醇迅速混合均匀，厌氧环境37℃静置0.5~1 h，进行解酒反应；9)测定解酒反应前后乙醇浓度的变化值，比较即可得到各初筛菌株的解酒能力的定量大小，选取性能突出的菌株即可。