[发明专利]猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法无效
| 申请号： | 201410104575.8 | 申请日： | 2014-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN103898044A | 公开（公告）日： | 2014-07-02 |
| 发明（设计）人： | 侯贤敏;郭敬;崔保安;郭官鹏;陈红英 | 申请（专利权）人： | 河南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12R1/91 |
| 代理公司： | 郑州优盾知识产权代理有限公司 41125 | 代理人： | 张绍琳;张真真 |
| 地址： | 450002*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法，它的步骤如下：（1）将PK15细胞复苏后培养于细胞瓶中长成细胞单层，用质量分数为0.25%的胰酶消化，然后加入DMEM生长液吹打，所述DMEM生长液含质量分数为10%的胎牛血清和质量分数为1%的双抗，分散细胞成单个，用系列稀释法进行细胞克隆；（2）通过间接免疫荧光筛选出对PCV2高敏感性的单细胞株。本发明采用更为方便高效的单细胞克隆技术获得一株对PCV2具有更高感染率的细胞系，命名为L8。通过对该细胞系的稳定性以及纯净性检测发现该细胞系能够稳定的提高PCV2在细胞内的增殖滴度。 | ||
| 搜索关键词： | 圆环 病毒 敏感性 pk15 细胞系 l8 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种猪圆环病毒2型高敏感性PK15细胞系L8的制备方法，其特征在于，它的步骤如下：（1）将PK15细胞复苏后培养于细胞瓶中长成细胞单层，用质量分数为0.25%的胰酶消化，然后加入DMEM生长液吹打，所述DMEM生长液含质量分数为10%的胎牛血清和质量分数为1%的双抗，分散细胞成单个，用系列稀释法进行细胞克隆；（2）通过间接免疫荧光筛选出对PCV2高敏感性的单细胞株。
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