[发明专利]双核酸标记的比率电化学免疫传感器

摘要

本发明涉及一种基于双核酸标记的比率电化学免疫传感器。在金电极表面组装两端分别标记巯基与二茂铁的DNA3，与亚甲基蓝标记的互补DNA1-抗体1杂交，构成比率电化学免疫传感界面。目标蛋白质存在时，DNA2-抗体2、目标蛋白质与DNA1-抗体1形成夹心免疫复合物，产生邻位效应，使DNA2与DNA1杂交，导致DNA1-抗体1脱离传感界面、自由的DNA3在表面形成发夹结构。在该过程中，电化学活性的亚甲基蓝和二茂铁分别远离和靠近电极表面，其氧化电流分别减小和增加。通过检测这两个电流的比值，实现溶液中目标蛋白质的浓度测定。该传感器灵敏度高，检测浓度范围宽，实现了蛋白质的快速、一步化检测，具有临床应用价值。

主权项

本发明涉及一种双核酸标记的比率电化学免疫传感器。其特征在于该传感器由二茂铁(Fc)标记DNA3捕获探针、亚甲基蓝(MB)标记DNA1‑抗体1和DNA2‑抗体2组成：DNA3另一端用巯基(SH)修饰，在金电极(Au)上通过Au‑S键组装；DNA1与DNA3可以杂交，将MB引到电极表面，形成比率电化学免疫传感界面；在目标蛋白质存在时，DNA2‑抗体2与目标物和DNA1‑抗体1通过夹心免疫反应形成免疫复合物，并产生邻位效应，该效应促使DNA2与DNA1杂交，导致MB‑DNA1‑抗体1脱离免疫传感界面，自由的DNA3在金电极表面形成发夹结构，而使Fc向电极表面靠近；通过检测免疫反应后减少的MB的氧化电流和增加的Fc的氧化电流，用Fc和MB的氧化电流之比进行溶液中目标蛋白质的浓度测定。