[发明专利]一种区分不同来源白藜芦醇的LC-QTOF分析方法

摘要

本发明属于分析化学领域，以虎杖来源的白藜芦醇和葡萄藤来源的白藜芦醇为研究对象，利用高灵敏度高分辨率的液质联用技术(LC-QTOF)以提供更多化合物结构信息的特点，研究白藜芦醇样品中的微量成分差异，找到了可以区分不同来源白藜芦醇的四种标示化合物，进一步确认了虎杖和葡萄藤来源白藜芦醇样品中的微量成分差异，对于区分不同原料来源的白藜芦醇样品提供了方法借鉴，对天然保健食品-白藜芦醇的真实属性识别具有重要的意义。同时，该技术方法也可以广泛的推广应用于进出口农产品和生物原料的真实属性检测和鉴别标准中，为天然产物原料真实属性的识别提供技术示范和参考标准的建立。

主权项

一种区分不同来源白藜芦醇的LC‑QTOF分析方法，其特征是，具体步骤为：（1）配制检测样品：取白藜芦醇质量含量相同的虎杖提取物样品和葡萄藤提取物样品，加入醇溶解，配制成样品质量浓度相同的溶液，在25℃‑30℃下超声25‑35min，静置冷却，微孔滤膜过滤，滤液作为检测样品；（2）检测：将检测样品进行液相色谱/四级杆‑飞行时间质谱联用方法进行分析，得到液相色谱图和质谱图和数据；其中，分析条件控制如下：a）液相色谱分析条件色谱柱：XUnion C18；流动相：乙腈‑水；梯度洗脱：0‑30min，流动相中乙腈的体积浓度为10%‑50%；30‑40min，流动相中乙腈的体积浓度为50%‑95%；40‑42min，流动相中乙腈的体积浓度为95%‑10%；42‑50min，流动相中乙腈的体积浓度为10%；流速：0.1‑0.3mL/min；柱温：25℃‑35℃；检测波长：287nm；b）质谱分析条件离子源：ESI            雾化气：50‑60psig；扫描方式：负离子模式   干燥气流速：5‑7L/min；鞘气温度：400℃；      毛细管电压：3000V；鞘气流速：10‑14L/min； 裂解电压：125‑145V；锥孔电压：50‑70V；     质量扫描范围：100‑1700m/z，每0.2s采集1次图谱；（3）对图谱和数据分析：对采集到的虎杖及葡萄藤来源白藜芦醇质谱图和数据进行分析，得到共有峰；（4）特征化合物确认利用质谱分析获得的虎杖、葡萄藤来源白藜芦醇指纹图谱中共有峰的化合物信息，根据精确分子量进一步对总离子流图进行离子提取，得到EIC图，对比EIC图中的出峰差异，得到两者间具有明显差异性的特征化合物；（5）判断根据特征化合物来判断白藜芦醇的不同来源。