[发明专利]一种测定人血浆中丹参素，间位甲基丹参素，原儿茶醛及原儿茶酸的方法

摘要

本发明涉及一种药物含量的测定方法，特别涉及一种测定人血浆中丹参素，间位甲基丹参素，原儿茶醛及原儿茶酸的方法。本发明所述的方法，包括以下步骤1）对照品储备液的制备称取丹参素、间位甲基丹参素、原儿茶醛和原儿茶酸对照品，用甲醇溶解，即得丹参素、间位甲基丹参素、原儿茶醛和原儿茶酸对照品储备液。2）内标溶液的制备取内标物香草酸用甲醇溶解即得内标溶液。3）血浆样品处理方法取血浆样品，加入内标溶液，甲醇，盐酸，乙酸乙酯，混合均匀后，离心取上清乙酸乙酯层，干燥，用甲醇复溶，离心，得血浆样品上清液。4）含量测定采用LC‑MS/MS色谱法，将上述对照品储备液和血浆样品上清液注入色谱仪，得到色谱图，根据色谱图中色谱峰的面积计算丹参素、间位甲基丹参素、原儿茶醛和原儿茶酸在血浆中的浓度。

主权项

一种测定人血浆中丹参素，间位甲基丹参素，原儿茶醛及原儿茶酸的方法，其特征在于，所述方法，包括以下步骤：1)对照品储备液的制备称取丹参素、间位甲基丹参素、原儿茶醛和原儿茶酸对照品，用甲醇溶解，即得丹参素、间位甲基丹参素、原儿茶醛和原儿茶酸对照品储备液；2)内标溶液的制备取内标物香草酸用甲醇溶解即得内标溶液；3)血浆样品处理方法取血浆样品，加入内标溶液，甲醇，盐酸或三氯乙酸或高氯酸，乙酸乙酯，混合均匀后，离心取上清乙酸乙酯层，干燥，用甲醇复溶，离心，得血浆样品上清液；4)含量测定采用LC‑MS/MS色谱法，将上述对照品储备液和血浆样品上清液注入色谱仪，得到色谱图，根据色谱图中色谱峰的面积计算丹参素、间位甲基丹参素、原儿茶醛和原儿茶酸在血浆中的浓度，其中所述LC‑MS/MS色谱法，色谱条件如下：色谱柱：C18柱；预柱；菲罗门公司预柱，流动相：A相为0.1‑0.5％的甲酸水溶液和B相为含0.1‑0.5％甲酸的甲醇，进行梯度洗脱：B相0‑0.5min 1％～4％内平衡，B相0.5‑4.5min从1％～4％变成75％～95％，B相4.51‑5min从75％～95％变成95％，B相5.01‑6.5min从7 5％～95％变成1％～4％；流速：0.2～0.5ml/min；柱温：15～35℃；进样器温度：2～10℃；质谱条件：采用ESI离子源，负离子模式，选择多反应监测模式MRM进行二级质谱分析，相关质谱参数如下：Collision Gas：Medium；IonSpray Voltage：–3000～–5500V；Temperature：400～700℃；Curtain Gas：10.0～40.0；Ion Source Gas1：40.0～80.0；Ion Source Gas2：35.0～75.0。