[发明专利]一种病人血液中百草枯的快速检测方法

摘要

一种病人血液中百草枯的快速检测方法，1）百草枯高效液相色谱法的建立：HPLC条件：高效液相色谱仪，色谱柱shim-pack:vp-ODS柱（4.6mm*250mm,5μm），流动相：乙腈-0.02mol/L辛烷基磺酸钠，辛烷基磺酸钠用0.26moL/L的磷酸调pH值为2.5；流速：1.0mL·min^-1；柱温25℃；检测波长254nm；2）PQ含药血清的制备：对照品的制备：精密吸取健康人血清200μL，加入已知浓度的PQ水溶液100μL，加入乙腈400μL混漩，离心10min，取上清液,离心10min，取上清液进行HPLC分析；3）样品的制备：精密吸取病人血清200μL，加入乙腈400μL混漩1min，离心10min，取上清液,离心10min，取上清液进行HPLC分析；4）空白溶液的制备：精密吸取健康人血清200μL，加入蒸馏水100μL，加入乙腈400μL混漩1min，离心10min，取上清液,离心10min，取上清液进行HPLC分析。

主权项

一种病人血液中百草枯的快速检测方法，其特征在于：包括以下方法步骤1）百草枯高效液相色谱法的建立条件：高效液相色谱仪，色谱柱shim‑pack:vp‑ODS柱4.6mm*250mm，5μm；流动相：乙腈‑0.02mol/L辛烷基磺酸钠，辛烷基磺酸钠用0.26moL/L的磷酸调pH值为2.5；流速：1.0mL·min^‑1；柱温25℃；检测波长254nm；2）PQ含药血清的制备对照品的制备精密吸取健康人血清200μL，加入已知浓度的PQ水溶液100μL，加入乙腈400μL混漩1min，3500r/min^‑1离心10min，取上清液,10000r/min^‑1离心10min，取上清液进行HPLC分析；得对照品峰面积Ar；样品的制备精密吸取病人血清200μL，加入乙腈400μL混漩1min，3500r/min^‑1离心10min，取上清液,10000r/min^‑1离心10min，取上清液进行HPLC分析；得样品峰面积Ax；空白血清的制备精密吸取健康人血清200μL，加入蒸馏水100μL，加入乙腈400μL混漩1min，3500r/min^‑1离心10min，取上清液,10000r/min^‑1离心10min，取上清液进行HPLC分析；3）PQ标准曲线用空白血清分别配制0.1，0.2，0.5，1，5，10，25，50和100μg/ml的百草枯血清标准系列液,分装后于4℃保存备用,在上述色谱条件下进样分析，以百草枯浓度（x）为横坐标,百草枯面积（y）为纵坐标,进行线性回归，得PQ的回归方程(y=ax+b)。根据计算公式：Cx=Cr*Ax/Ar，其中：Cx为样品浓度Cr为对照品浓度Ax为样品峰面积Ar为对照峰品面积根据上述公式进行计算，得到病人血样中百草枯的浓度，或者根据PQ标准曲线，将Ax代入曲线，也可得到病人血样中百草枯的浓度。