[发明专利]一种病人血液中百草枯的快速检测方法

权利要求书

1.一种病人血液中百草枯的快速检测方法，其特征在于：包括以下方法步骤

1）百草枯高效液相色谱法的建立

条件：高效液相色谱仪，色谱柱shim-pack:vp-ODS柱4.6mm*250mm，5μm；流动相：乙腈-0.02mol/L辛烷基磺酸钠，辛烷基磺酸钠用0.26moL/L的磷酸调pH值为2.5；流速：1.0mL·min^-1；柱温25℃；检测波长254nm；

2）PQ含药血清的制备

对照品的制备

精密吸取健康人血清200μL，加入已知浓度的PQ水溶液100μL，加入乙腈400μL混漩1min，3500r/min^-1离心10min，取上清液,10000r/min^-1离心10min，取上清液进行HPLC分析；得对照品峰面积Ar；

样品的制备

精密吸取病人血清200μL，加入乙腈400μL混漩1min，3500r/min^-1离心10min，取上清液,10000r/min^-1离心10min，取上清液进行HPLC分析；得样品峰面积Ax；

空白血清的制备

精密吸取健康人血清200μL，加入蒸馏水100μL，加入乙腈400μL混漩1min，3500r/min^-1离心10min，取上清液,10000r/min^-1离心10min，取上清液进行HPLC分析；

3）PQ标准曲线

用空白血清分别配制0.1，0.2，0.5，1，5，10，25，50和100μg/ml的百草枯血清标准系列液,分装后于4℃保存备用,在上述色谱条件下进样分析，以百草枯浓度（x）为横坐标,百草枯面积（y）为纵坐标,进行线性回归，得PQ的回归方程(y=ax+b)。

根据计算公式：Cx=Cr*Ax/Ar，

其中：Cx为样品浓度

Cr为对照品浓度

Ax为样品峰面积

Ar为对照峰品面积

根据上述公式进行计算，得到病人血样中百草枯的浓度，或者根据PQ标准曲线，将Ax代入曲线，也可得到病人血样中百草枯的浓度。