[发明专利]F基因型腮腺炎病毒株MHM-19的二倍体细胞适应方法

摘要

本发明提供F基因型腮腺炎病毒株MHM-19的二倍体细胞适应方法，将人胚肺二倍体细胞MHL-3加入到预温到36-37℃的MEM细胞培养液中，置于36-37℃培养，经2-3天长成单层细胞后接种F基因型腮腺炎病毒MHM-19株悬液，每75cm²培养瓶接种1mL病毒悬液，加入维持液，置于32-34℃培养，培养7-10天后，将细胞冻融三次，将病毒释放到细胞上清液中，制成病毒悬液；按以上方法，将F基因型腮腺炎病毒MHM-19株连续在MHL-3细胞上传代28次，病毒滴度可达6.0-6.5lgCCID₅₀/mL。免疫原性和交叉保护试验表明，用该病毒株生产的疫苗具有良好的免疫原性及安全性，是生产F基因型减毒活疫苗的理性毒株。

主权项

F基因型腮腺炎病毒株MHM‑19的二倍体细胞适应方法，其特征在于，将人胚肺二倍体细胞MHL‑3加入到预温到36‑37℃的MEM细胞培养液中，置于36‑37℃培养，经2‑3天长成单层细胞后接种F基因型腮腺炎病毒MHM‑19株悬液，每75cm²培养瓶接种1mL病毒悬液，加入维持液，置于32‑34℃培养，培养7‑10天后，将细胞冻融三次，将病毒释放到细胞上清液中，制成病毒悬液；按以上方法，将F基因型腮腺炎病毒MHM‑19株连续在MHL‑3细胞上传代28次，获得在MHL‑3细胞上适应性好的F基因型腮腺炎病毒株MHM‑19；其中，所述维持液为含有2%小牛血清的MEM细胞培养液。