[发明专利]F基因型腮腺炎病毒株MHM-19的二倍体细胞适应方法无效
申请号: | 201410007618.0 | 申请日: | 2014-01-08 |
公开(公告)号: | CN103756976A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 李黎;柳洪涛;张现臣;刘雨;孟红彦;黄秋香;魏文进 | 申请(专利权)人: | 北京民海生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K39/165;A61P31/14;C12R1/93 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 102600 北京市中关村*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因型 腮腺炎 病毒 mhm 19 二倍 体细胞 适应 方法 | ||
1.F基因型腮腺炎病毒株MHM-19的二倍体细胞适应方法,其特征在于,将人胚肺二倍体细胞MHL-3加入到预温到36-37℃的MEM细胞培养液中,置于36-37℃培养,经2-3天长成单层细胞后接种F基因型腮腺炎病毒MHM-19株悬液,每75cm2培养瓶接种1mL病毒悬液,加入维持液,置于32-34℃培养,培养7-10天后,将细胞冻融三次,将病毒释放到细胞上清液中,制成病毒悬液;按以上方法,将F基因型腮腺炎病毒MHM-19株连续在MHL-3细胞上传代28次,获得在MHL-3细胞上适应性好的F基因型腮腺炎病毒株MHM-19;
其中,所述维持液为含有2%小牛血清的MEM细胞培养液。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,将人胚肺二倍体细胞MHL-3加入到预温到37℃的MEM细胞培养液中,置于37℃培养,经2-3天长成单层细胞后接种F基因型腮腺炎病毒MHM-19株悬液,每75cm2培养瓶接种1mL病毒悬液,加入20mL维持液,置于33℃培养,培养10天后,将细胞冻融三次,将病毒释放到细胞上清液中,制成病毒悬液;按以上方法,将F基因型腮腺炎病毒MHM-19株连续在MHL-3细胞上传代28次,获得在MHL-3细胞上适应性好的F基因型腮腺炎病毒株MHM-19。
3.根据权利要求1或2所述方法制备的F基因型腮腺炎病毒的二倍体细胞适应株MHM-19。
4.权利要求3所述F基因型腮腺炎病毒的二倍体细胞适应株MHM-19在制备腮腺炎疫苗中的应用。
5.权利要求3所述F基因型腮腺炎病毒的二倍体细胞适应株MHM-19在制备用于预防腮腺炎的药物中的应用。
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