[发明专利]鼠表皮生长因子在巴斯德毕赤酵母中的表达方法和纯化无效
| 申请号： | 201410000614.X | 申请日： | 2014-01-02 |
| 公开（公告）号： | CN103882050A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 王喆明 | 申请（专利权）人： | 杭州璞题生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C07K14/485;C07K1/22;C12R1/84 |
| 代理公司： | 杭州华知专利事务所 33235 | 代理人： | 宁冈 |
| 地址： | 311121 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鼠表皮生长因子在巴斯德毕赤酵母中的表达方法和纯化，包括以下步骤：（1）构建重组质粒pBSAZ2.1；（2）电转化表达pBSAZ2.1蛋白的重组巴斯德毕赤酵母；（3）阳性重组菌株的筛选；（4）诱导重组菌表达鼠表皮生长因子；（5）鼠表皮生长因子的纯化。本发明采用基因工程的方法，将mEGF基因连接至表达载体上，在巴斯德酵母细胞中完成分泌表达，从而构建出含mEGF目的基因的基因工程菌。能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近天然的生物蛋白质分子。可以避免蛋白在保内聚集形成包涵体，使目的蛋白的下游纯化更加简单，利于大规模处理。 | ||
| 搜索关键词： | 表皮 生长因子 巴斯德毕赤 酵母 中的 表达 方法 纯化 | ||
【主权项】：
一种鼠表皮生长因子在巴斯德毕赤酵母中的表达方法和纯化，其特征在于，包括以下步骤：（1）构建重组质粒pBSAZ 2.1；（2）电转化表达pBSAZ 2.1蛋白的重组巴斯德毕赤酵母；（3）阳性重组菌株的筛选；（4）诱导重组菌表达鼠表皮生长因子；（5）鼠表皮生长因子的纯化。
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