[发明专利]单细胞的多转录物的高通量测序有效
申请号: | 201380041707.0 | 申请日: | 2013-06-17 |
公开(公告)号: | CN104619862B | 公开(公告)日: | 2017-10-31 |
发明(设计)人: | 斯科特·亨尼克-史密斯;布兰登·德科斯盖;安迪·埃林顿;乔治·乔治乌 | 申请(专利权)人: | 得克萨斯系统大学董事会 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司11332 | 代理人: | 巩克栋,杨生平 |
地址: | 美国德*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本公开大体上涉及以高通量方式测序表达于单细胞中的两个或更多个基因。更具体地说,本公开涉及一种用于高通量测序共表达于单细胞中的成对转录物(例如抗体VH和VL编码序列)以测定包括免疫受体的成对多肽链的方法。 | ||
搜索关键词: | 单细胞 转录 通量 | ||
【主权项】:
一种获得成对TCR序列或成对抗体VH和VL序列的方法,其包括:a)将单细胞和mRNA捕获剂隔离到单独隔室中,其中所述单独隔室为乳液中的微泡;b)裂解所述细胞并且用所述mRNA捕获剂收集mRNA转录物;c)使用所述mRNA捕获剂从所述隔室分离所述mRNA;d)进行逆转录,接着对所述捕获的mRNA进行PCR扩增;以及e)测序从单细胞扩增的至少两个不同cDNA产物;其中所述细胞为T细胞或B细胞;所述mRNA捕获剂为珠粒且所述珠粒包括杂交mRNA的寡核苷酸;并且所述至少两个不同cDNA产物提供成对TCR序列或成对抗体VH和VL序列。
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