[发明专利]一种酶解法制备蜂王胚胎肽的方法

摘要

本发明是一种酶解法制备蜂王胚胎肽的方法，包括：样品预处理、蜂王幼虫粉末脱脂、蜂王幼虫粉样品液配制、超声波处理蜂王幼虫粉样品液、蜂王幼虫粉样品液酶解反应、将酶解液置于沸水浴中加热20分钟灭酶，冷却至常温，将酶解液pH值调至7.0，离心后取上清液、干燥上述上清液获得水解的蜂王胚胎肽粉。本发明制得的蜂王胚胎多肽能够用于制作改善人体机能的保健品，且更重要的是从水解的蜂王胚胎多肽中筛选得到对人体真正有效的生物活性多肽。

主权项

一种酶解法制备蜂王胚胎肽的方法，其特征在于，包括：步骤1：样品预处理：将蜂王幼虫在存活期内‑80℃迅速冷冻，并干燥，将干燥的蜂王幼虫样品研磨成粉；步骤2：蜂王幼虫粉末脱脂：将预处理过的蜂王幼虫粉末样品放入超临界萃取装置脱脂，脱脂条件：萃取压力35MPa，萃取温度35℃，萃取时间200分钟，常压分离，收集脱脂后的蜂王幼虫蛋白用于进行酶解；步骤3：蜂王幼虫粉样品液配制：以上述脱脂后的蜂王幼虫粉为原料，该原料中蛋白质的含量为在70％以上，将该蜂王幼虫粉原料按照料液比1∶10(w／v)加入去离子水50℃搅拌混匀4小时，获得蜂王幼虫粉样品液；步骤4：超声波处理蜂王幼虫粉样品液：使用功率250W～1250W的脉冲超声波进行对蜂王幼虫粉样品液预处理，超声波处理时间30分钟，对应一个脉冲的超声波发出时间2～4s、间隙时间2s；步骤5：蜂王幼虫粉样品液酶解反应：将超声波处理后的脱脂蜂王幼虫粉样品液pH调至7.5～8.5，在恒温水浴中加热至40℃～60℃，按照酶与脱脂蜂王幼虫粉样品液质量比例0.02～0.04∶1加入复合蛋白酶，所述复合蛋白酶由中性蛋白酶和风味蛋白酶按照质量比例1∶1组成，水解度达到20％时停止反应；步骤6：将酶解液置于沸水浴中加热20分钟灭酶，冷却至常温，将酶解液pH值调至7.0，离心后取上清液；步骤7：干燥上述上清液获得水解的蜂王胚胎肽粉。