[发明专利]包裹纳米金颗粒的PEG功能化的PAMAM树状大分子载体的基因转染方法无效
申请号: | 201310728846.2 | 申请日: | 2013-12-25 |
公开(公告)号: | CN103710388A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 史向阳;侯文秀;郭睿;孔令丹 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;C12N15/85 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达 |
地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种包裹纳米金颗粒的PEG功能化的PAMAM树状大分子载体的基因转染方法,包括:(1)制备活化好的mPEG溶液;称取第五代PAMAM树状大分子溶于DMSO中,然后加入活化好的mPEG溶液,室温下磁力搅拌,反应得到G5.NH2-mPEG10溶液;(2)在上述G5.NH2-mPEG10溶液中逐滴加入HAuCl4水溶液,搅拌后快速加入NaBH4溶液,得到反应产物;(3)将反应产物与pDNA或siRNA制备载体/基因复合物溶液;(4)采用上述载体/基因复合物溶液进行细胞转染。本发明制备的载体用于基因转染具有转染条件温和,易于操作,转染效率高,特异性好等优点,在癌症治疗等方面具有很好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 包裹 纳米 颗粒 peg 功能 pamam 树状 大分子 载体 基因 转染 方法 | ||
【主权项】:
一种包裹纳米金颗粒的PEG功能化的PAMAM树状大分子载体的基因转染方法,包括:(1)将mPEG‑COOH溶于DMSO中,用EDC的DMSO溶液活化,得到活化好的mPEG溶液;称取第五代PAMAM树状大分子溶于DMSO中,按照mPEG‑COOH/G5.NH2摩尔比为10/1,加入活化好的mPEG溶液,室温下磁力搅拌,反应得到G5.NH2‑mPEG10溶液;(2)在上述G5.NH2‑mPEG10溶液中逐滴加入HAuCl4水溶液,搅拌后快速加入NaBH4溶液,还原反应结束后,将反应产物透析,然后进行冷冻干燥处理,得到反应产物Au0‑G5.NH2‑mPEG10;(3)将Au0‑G5.NH2‑mPEG10与pDNA或siRNA制备载体/基因复合物溶液;(4)采用上述载体/基因复合物溶液进行细胞转染。
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