[发明专利]流感病毒裂解疫苗的纯化方法有效
| 申请号: | 201310681952.X | 申请日: | 2013-12-12 |
| 公开(公告)号: | CN103721251A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
| 发明(设计)人: | 王金辉;郝中华;陈栋;胡伟;李军;尹卫东 | 申请(专利权)人: | 北京科兴生物制品有限公司 |
| 主分类号: | A61K39/145 | 分类号: | A61K39/145;A61P31/16 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | 本发明提供一种流感病毒裂解疫苗的纯化方法,将流感病毒株接种鸡胚,经培养收获病毒液,病毒液经灭活后进行超滤浓缩,所得超滤液用KII连续流离心机进行蔗糖密度梯度离心,得到超离液,对超离液进行超滤透析去除蔗糖后进行分子筛凝胶层析,获得的病毒纯化液用裂解剂TritonX-100和去氧胆酸钠进行病毒裂解,裂解结束后,通过超滤透析去除裂解剂,获得的裂解液离心去除杂蛋白,收集上清经过滤除菌后,即得纯化的流感病毒裂解疫苗原液。本方法操作简便、离心容量大、适合大规模生产;采用双裂解剂和离心工艺,使最终产品的活性比(血凝素含量/总蛋白质含量)大幅提高,接近亚单位疫苗的活性比,获得了高品质的流感病毒裂解疫苗产品。 | ||
| 搜索关键词: | 流感病毒 裂解 疫苗 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种流感病毒裂解疫苗的纯化方法,其特征在于,将流感病毒株接种鸡胚,经培养收获病毒液,病毒液经灭活后进行超滤浓缩,所得超滤液用KII连续流离心机进行蔗糖密度梯度离心,得到超离液,对超离液进行超滤透析去除蔗糖后进行分子筛凝胶层析,获得的病毒纯化液用裂解剂TritonX‑100和去氧胆酸钠进行病毒裂解,裂解结束后,通过超滤透析去除裂解剂,获得的裂解液离心去除杂蛋白,收集上清经过滤除菌后,即得纯化的流感病毒裂解疫苗原液。
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