[发明专利]一种基因重组菌发酵生产辅酶Q10的方法

摘要

一种基因重组菌发酵生产辅酶Q10的方法,将NAD激酶基因转入高效表达还原性辅酶Q10的菌株；所述的重组菌优化的培养条件为（1）斜面活化；（2）种子培养；（3）发酵培养。本发明通过基因工程手段构建的重组菌，稳定性强，其辅酶Q10产量较出发菌株提高了21.6%，达到1.63 g/L，能够达到工业生产的要求。

主权项

一种基因重组菌发酵生产辅酶Q10的方法，其特征在于，将NAD激酶基因转入高效表达还原性辅酶Q10的菌株；所述NAD激酶基因为类红球细菌NAD激酶基因；所述高效表达还原性辅酶Q10的出发菌株为：类红球细菌（Rhodobacter sphaeroides）；所述类红球细菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC NO.1.2569；所述重组菌的培养条件为：（1）斜面活化：葡萄糖 10‑25 g/L，牛肉膏 5‑15 g/L，酵母粉 5‑20 g/L，氯化钠 5‑10 g/L，琼脂粉 5‑20 g/L，pH5‑8，121℃灭菌20 min，确定无污染后接种重组菌，28‑35℃培养2‑8天；（2）种子培养：葡萄糖 10‑30 g/L，玉米浆 5‑20 g/L，酵母粉 5‑25 g/L，硝酸钠 2‑8 g/L，磷酸二氢钾 1‑2 g/L，七水硫酸镁 0.2‑1 g/L，pH5‑8，121℃灭菌20 min，冷却后从活化好的斜面取一环菌体接种，25‑38℃震荡培养5‑32小时；（3）发酵培养：葡萄糖 30‑80 g/L，玉米浆 5‑40 g/L，酵母粉 5‑25 g/L，硝酸钠 2‑10 g/L，磷酸二氢钾 1‑2 g/L，七水硫酸镁 0.2‑1 g/L，一水硫酸锰 0.01‑0.05 g/L，七水硫酸亚铁 0.01‑0.05 g/L，生物素 1×10‑5‑9×10‑5 g/L，pH5‑8，121‑125℃灭菌20 min，接种量为1‑10%，25‑38℃震荡培养2‑7天。