[发明专利]一种基因重组菌发酵生产辅酶Q10的方法有效
申请号: | 201310668128.0 | 申请日: | 2013-12-11 |
公开(公告)号: | CN103820506B | 公开(公告)日: | 2017-04-05 |
发明(设计)人: | 陶帅;刘志强 | 申请(专利权)人: | 湖南科源生物制品有限公司 |
主分类号: | C12P7/66 | 分类号: | C12P7/66;C12N15/74;C12R1/01 |
代理公司: | 长沙星耀专利事务所43205 | 代理人: | 宁星耀,许伯严 |
地址: | 410000 湖南省长沙*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基因 重组 发酵 生产 辅酶 q10 方法 | ||
1. 一种基因重组菌发酵生产辅酶Q10的方法,其特征在于,将NAD激酶基因转入高效表达还原性辅酶Q10的菌株。
2.根据权利要求1所述的基因重组菌发酵生产辅酶Q10的方法,其特征在于,所述高效表达还原性辅酶Q10的出发菌株为:类红球细菌(Rhodobacter sphaeroides);所述类红球细菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC NO.1.25691.2569。
3.根据权利要求1或2所述的基因重组菌发酵生产辅酶Q10的方法,其特征在于,所述重组菌的培养条件为:
(1)斜面活化:葡萄糖 10-25 g/L,牛肉膏 5-15 g/L,酵母粉 5-20 g/L,氯化钠 5-10 g/L,琼脂粉 5-20 g/L,pH5-8,121℃灭菌20 min,确定无污染后接种重组菌,28-35℃培养2-8天;
(2)种子培养:葡萄糖 10-30 g/L,玉米浆 5-20 g/L,酵母粉 5-25 g/L,硝酸钠 2-8 g/L,磷酸二氢钾 1-2 g/L,七水硫酸镁 0.2-1 g/L,pH5-8,121℃灭菌20 min,冷却后从活化好的斜面取一环菌体接种,25-38℃震荡培养5-32小时;
(3)发酵培养:葡萄糖 30-80 g/L,玉米浆 5-40 g/L,酵母粉 5-25 g/L,硝酸钠 2-10 g/L,磷酸二氢钾 1-2 g/L,七水硫酸镁 0.2-1 g/L,一水硫酸锰 0.01-0.05 g/L,七水硫酸亚铁 0.01-0.05 g/L,生物素 (1-9)×10-5 g/L,pH5-8,121-125℃灭菌20 min,接种量为1-10%,25-38℃震荡培养2-7天。
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