[发明专利]双链接头、其应用及构建末端配对DNA文库的方法有效
| 申请号: | 201310655625.7 | 申请日: | 2013-12-05 |
| 公开(公告)号: | CN103667273A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
| 发明(设计)人: | 蒋智;王大伟;刘运超;曹志生;刘建;魏勤;杜长诗 | 申请(专利权)人: | 北京诺禾致源生物信息科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C40B40/06;C40B50/06;C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 吴贵明;张永明 |
| 地址: | 100083 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种提双链接头、其应用及构建末端配对DNA文库的方法。双链接头包括接头A和接头B,接头A和接头B分别包括一个LoxP序列和将LoxP序列同方向地连接到待环化的DNA片段两端的辅助序列。应用本发明的技术方案,基于Cre重组酶/LoxP作用系统特性(当两个LoxP序列位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的序列,而切除部分的序列将自动成环形状态而实现DNA长片段的环化)设计的双连接头,通过T-A克隆的方式高效地连接到用于构建末端配对DNA文库的DNA片段的两端,然后采用Cre重组酶体系能够高效的使用于构建末端配对DNA文库的DNA片段环化。 | ||
| 搜索关键词: | 链接 应用 构建 末端 配对 dna 文库 方法 | ||
【主权项】:
一种双链接头,其特征在于,包括接头A和接头B,所述接头A和所述接头B分别包括一个LoxP序列和将所述LoxP序列同方向地连接到待环化的DNA片段两端的辅助序列。
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