[发明专利]一种测定保健食品中叶酸含量的色谱方法

摘要

本发明公开了一种测定保健食品中叶酸含量的色谱方法，包括以下步骤：（1）检测样品处理；（2）标准品的制备；（3）色谱条件设定；（4）样品对照，在检测样品处理过程中加入二乙三胺五乙酸（DTPA）和维生素C，以调节离子强度，掩蔽微量元素离子对检测的干扰，从而实现直接准确测定保健品中叶酸的含量。这一技术色谱检测结果准确可靠，解决了传统测定过程所得结果与实际值偏离的问题，满足实际测定要求。

主权项

一种测定保健食品中叶酸含量的色谱方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）检测样品处理：取适量样品磨细并称量，置于50ml棕色容量瓶中，加入适量DTPA和维生素C，用0.5％氨水超声使溶解，并控制PH=8~9，之后用少量0.5％氨水定容；取适量所得溶液于离心管中，离心约15 min，取上清液待测；（2）标准品的制备：精密称取20mg叶酸对照品至一100 ml棕色容量瓶中，用0.5％氨水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液;精密吸取1 ml标准贮备液至一10ml容量瓶中，用0.5％氨水溶解并稀释至刻度，作为标准工作溶液；（3）色谱条件设定：a. 色谱柱：采用5μm反相C8色谱柱（250 mm ×416 mm）；b. 流动相：流动相A：0.05M Na₃PO₄ (pH 2.5)：甲醇=90：10；流动相B：0.05M Na₃PO₄(pH 2.5)：甲醇=10：90；梯度：在18 min时达70% B；流速：1 mL/min；c. 检测器及检测波长：用二极管阵列检测器对叶酸标准溶液进行光谱扫描，在280 nm处有最大吸收峰，因此在检测试验中选择波长为280 nm；d. 进样量：20 μL；e. 柱温：30 °C；（4）通过待测样品与标准品的保留时间和峰面积关系进行对比，确定保健品中叶酸的含量。