[发明专利]一种测定保健食品中叶酸含量的色谱方法

权利要求书

1.一种测定保健食品中叶酸含量的色谱方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）检测样品处理：取适量样品磨细并称量，置于50ml棕色容量瓶中，加入适量DTPA和维生素C，用0.5％氨水超声使溶解，并控制PH=8~9，之后用少量0.5％氨水定容；取适量所得溶液于离心管中，离心约15 min，取上清液待测；

（2）标准品的制备：精密称取20mg叶酸对照品至一100 ml棕色容量瓶中，用0.5％氨水溶解并稀释至刻度，作为标准贮备液;

精密吸取1 ml标准贮备液至一10ml容量瓶中，用0.5％氨水溶解并稀释至刻度，作为标准工作溶液；

（3）色谱条件设定：

a. 色谱柱：采用5μm反相C8色谱柱（250 mm ×416 mm）；

b. 流动相：

流动相A：0.05M Na₃PO₄ (pH 2.5)：甲醇=90：10；

流动相B：0.05M Na₃PO₄(pH 2.5)：甲醇=10：90；

梯度：在18 min时达70% B；

流速：1 mL/min；

c. 检测器及检测波长：用二极管阵列检测器对叶酸标准溶液进行光谱扫描，在280 nm处有最大吸收峰，因此在检测试验中选择波长为280 nm；

d. 进样量：20 μL；

e. 柱温：30 °C；

（4）通过待测样品与标准品的保留时间和峰面积关系进行对比，确定保健品中叶酸的含量。

2.根据权利要求1所述测定保健食品中叶酸含量的色谱方法，其特征在于：所述步骤（1）中的DTPA和维生素C也可应用结构与它们类似，功能十分相近的EDTA、抗坏血酸钠盐、钾盐等相似物质。

3.根据权利要求1所述测定保健食品中叶酸含量的色谱方法，其特征在于：所述步骤（3）中还可应用类似C8色谱柱的反相柱。

4.根据权利要求1所述测定保健食品中叶酸含量的色谱方法，其特征在于：测定对象不仅限于保健品，也可以是膳食补充剂或含有叶酸的药品等非保健品，或是生物及其制品。