[发明专利]一种胞外分泌表达κ-卡拉胶酶的重组菌构建方法及其应用无效
| 申请号： | 201310542183.5 | 申请日： | 2013-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN103555753A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 牟海津;刘哲民 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12N9/42;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种表达κ-卡拉胶酶的重组菌构建方法及其应用。克隆得到的Zobellia sp.ZM-2κ-卡拉胶酶前体基因cgkZ，并将其直接插入到原核表达载体pProEX-HTa上，转化大肠杆菌BL21(DE3)内，可得到具备高胞外分泌能力的且摇瓶培养条件下胞外酶活达9.4U／mL的重组菌。该酶在最适反应温度为39℃，在35℃比较稳定；最适pH为6.0，且在该pH条件下很稳定。高效表达的κ-卡拉胶酶对κ-卡拉胶有较好的降解效果，降解κ-卡拉胶生成四糖、六糖、八糖等硫酸寡糖，具有较好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 外分泌 表达 卡拉 重组 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种生产重组κ‑卡拉胶酶的重组菌株构建方法，其特征是κ‑卡拉胶酶基因cgkZ(GenBank号KC503903)通过重组表达质粒pProEX‑HTa‑cgkZ导入大肠杆菌BL21(DE3)；所述重组表达质粒pProEX‑HTa‑cgkZ是将cgkZ基因导入表达质粒pProEX‑HTa的多克隆位点得到。
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