[发明专利]一种破骨细胞的培养方法无效
申请号: | 201310501049.0 | 申请日: | 2013-10-21 |
公开(公告)号: | CN104560867A | 公开(公告)日: | 2015-04-29 |
发明(设计)人: | 秦宏佳 | 申请(专利权)人: | 大连市沙河口区中小微企业服务中心 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明提供了一种破骨细胞的培养方法。该方法包括如下步骤:(1)收集大鼠大腿骨和胫骨中的骨髓细胞,悬浮于细胞培养液中;(2)细胞悬浮液通过葡聚糖凝胶Sephadex G10色谱柱,用细胞培养液洗涤,收集细胞;(3)收集得到的细胞种于培养板内,培养板内添加含有细胞因子的培养基共同培养,每隔2天换液,培养4-7天,即可得到破骨细胞。本发明得到的破骨细胞,骨吸收能力好,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP+)染色活性强,且其培养方法简单,得到的破骨细胞数量多,可以满足破骨细胞相关细胞分子生物学实验和研究。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞 培养 方法 | ||
【主权项】:
一种破骨细胞的培养方法,包括如下步骤:(1)收集大鼠大腿骨和胫骨中的骨髓细胞,悬浮于细胞培养液中;(2)细胞悬浮液通过葡聚糖凝胶Sephadex G10色谱柱,用细胞培养液洗涤,收集细胞;(3)收集得到的细胞种于培养板内,培养板内添加含有细胞因子的培养基共同培养,每隔2天换液,培养4‑7天,即可得到破骨细胞;其中,步骤(3)中所述培养基为含有10‑8M1a,25(OH)2D3、20‑100ng/ml破骨细胞生成因子、10‑50ng/ml巨噬细胞集落刺激因子、15‑20%胎牛血清的DMEM。
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